【摘 要】
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目的探讨乳化异氟醚对人神经母细胞瘤细胞(SHSY-5Y细胞)凋亡的影响及c-Jun氨基末端激酶(JNK)在其中的作用。方法将培养的SHSY-5Y细胞按种子96孔板或培养皿，采用随机数字表法分为8组：空白对照组(C组，n＝24)、不同浓度脂肪乳剂组[LE1组(n＝24)、LE2组(n＝24)和LE3组(n＝72)]、不同浓度乳化异氟醚组[EI1组(n＝24)、EI2组(n＝24)和EI3(n＝72)
【机 构】
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230032 合肥市，安徽医科大学第一附属医院麻醉科,230032 合肥市，安徽医科大学第一附属医院麻醉科,
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目的探讨乳化异氟醚对人神经母细胞瘤细胞(SHSY-5Y细胞)凋亡的影响及c-Jun氨基末端激酶(JNK)在其中的作用。
方法将培养的SHSY-5Y细胞按种子96孔板或培养皿，采用随机数字表法分为8组：空白对照组(C组，n＝24)、不同浓度脂肪乳剂组[LE1组(n＝24)、LE2组(n＝24)和LE3组(n＝72)]、不同浓度乳化异氟醚组[EI1组(n＝24)、EI2组(n＝24)和EI3(n＝72)]和乳化异氟醚＋JNK抑制剂SP600125组(EI-SP组，n＝24)。细胞铺板24 h时，LE1-3组加入30%脂肪乳剂，浓度分别为0.395 6、0.791 2和1.582 4 μl/ml；EI1-3组加入8%乳异氟醚，终浓度分别为0.56、1.12和2.24 mmol/L；EI-SP组加入乳化异氟醚，终浓度为1.12 mmol/L，并于加入乳化异氟醚前1 h加入SP600125，终浓度为10 μmol/L；C组不行任何处理。EI3组及LE3组于孵育6、12和24 h时，其余组孵育或培养24 h时观察细胞形态学、采用MTT法测定细胞活力、采用Western blot法测定细胞JNK、磷酸化JNK(p-JNK)和细胞色素c(Cyt c)的表达水平。
结果与C组比较，EI2组孵育24 h时、EI3组孵育12和24 h时细胞活力降低，p-JNK以及Cyt c表达上调，EI-SP组细胞活力降低(P<0.05)，p-JNK以及Cyt c表达差异无统计学意义，LE1-3组和EI1组细胞活力、p-JNK以及Cyt c表达差异无统计学意义(P>0.05)；与EI1组比较，EI2，3组孵育24 h时细胞活力降低，p-JNK以及Cyt c表达上调(P<0.05)；与EI2组比较，EI3组孵育24 h时细胞活力下降，p-JNK以及Cyt c表达上调，EI-SP组细胞活力升高，p-JNK以及Cyt c表达下调(P<0.05)；各组细胞JNK表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。
结论高浓度乳化异氟醚长时间作用才可诱发人神经细胞凋亡，低浓度短时间作用无此效应；乳化异氟醚诱发神经细胞凋亡的机制与激活JNK途径有关。
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