【摘 要】
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目的观察槲皮素对机械性创伤(MT)造成大鼠继发性心肌细胞及心脏功能损伤的保护效果,同时探究其作用机制。方法实验分为在体实验和离体实验。将120只成年雄性SD大鼠按随机数字
【机 构】
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大连医科大学生理学教研室,解放军沈阳军区大连疗养院桃园疗区
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目的观察槲皮素对机械性创伤(MT)造成大鼠继发性心肌细胞及心脏功能损伤的保护效果,同时探究其作用机制。方法实验分为在体实验和离体实验。将120只成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为4组,分别为正常组、创伤组、创伤+槲皮素和创伤+溶剂组。先后应用小动物定量创伤仪制备大鼠MT模型;经右颈总动脉向左心室内插管,记录左心室舒缩压力变化,检测大鼠心功能,初步研究槲皮素对心脏的保护作用;通过MTT比色法检测槲皮素对创伤诱导的H9c2细胞存活率的影响,确定槲皮素对心脏的保护效果;在槲皮素的保护机制研究中,TUNEL染色后计算心肌细胞凋亡指数,以评估心肌细胞的凋亡状况;通过酶标仪检测H9c2细胞在加入槲皮素前后产生活性氧(ROS)自由基的量的变化;激光共聚焦显微镜下观察测定经Fluo-4AM标记的心肌细胞内Ca2+的浓度变化,从而初步探讨槲皮素发挥保护作用的机制。结果 1心功能指标LVDP、+d P/dtmax、-d P/dtmax显示,创伤组、创伤+溶剂组与正常组比较均明显下降,而创伤+槲皮素组较创伤组升高(P<0.01)。2MTT检测发现,在一定的浓度范围内,槲皮素对H9c2细胞没有细胞毒性作用,并且可明显阻碍创伤血清对H9c2细胞的损伤。3MT后通过对正常组、创伤组、创伤+槲皮素组和创伤+溶剂组心肌细胞凋亡指数的检测,发现创伤+槲皮素组与创伤组比较凋亡指数明显降低(P<0.01)。4通过对H9c2细胞内ROS的检测,发现槲皮素能够减低MT后细胞内ROS的产生。5通过对心肌细胞内钙浓度变化的检测,发现MT后Ca2+浓度上升,给予一定浓度槲皮素后Ca2+浓度下降。结论在一定的浓度范围内,槲皮素能够降低MT后产生的ROS自由基,抑制Ca2+内流,继而降低心肌细胞凋亡,改善MT后心脏功能,发挥心脏保护作用。
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