【摘 要】
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目的通过转染pGenesil-APE/Ref1-shRNA抑制体外培养大鼠耳蜗螺旋神经节细胞（spiral ganglion cell,SGC）中无嘌呤无嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子1（apurinic/apyrimidimic endonuclase/redox factor 1,APE/Ref1）的表达,观察SGC在过氧化氢（H2O2）所致氧化应激环境中的活性及凋亡情况,探讨APE/Ref1在
【机 构】
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第三军医大学附属西南医院耳鼻咽喉头颈外科,重庆400038,第三军医大学附属西南医院耳鼻咽喉头颈外科,重庆400038,第三军医大学附属西南医院耳鼻咽喉头颈外科,重庆400038,第三军医大学附属西南
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目的通过转染pGenesil-APE/Ref1-shRNA抑制体外培养大鼠耳蜗螺旋神经节细胞（spiral ganglion cell,SGC）中无嘌呤无嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子1（apurinic/apyrimidimic endonuclase/redox factor 1,APE/Ref1）的表达,观察SGC在过氧化氢（H2O2）所致氧化应激环境中的活性及凋亡情况,探讨APE/Ref1在SGC抗氧化损伤过程中的作用.
方法体外培养大鼠SGC,加入pGenesil-APE/Ref1-shRNA转染72 h,更换培养基后加入不同浓度的H2O2 （0、10、25、50、100、300μmol/L）干预1h,更换正常培养基后继续培养24h.通过免疫印迹、分光光度检测法、原位缺口末端标记法（TUNEL）、四甲基偶氮唑蓝法（MTT）分别检测SGC APE/Refl、磷酸化组蛋白H2AX的表达、caspase3活性、细胞活性以及凋亡情况.
结果pGenesil-APE/Ref1-shRNA能明显抑制APE/Ref1的表达,H2O2损伤浓度在50 ～ 300 μmol/L时,与对照组相比,pGenesil-APE/Ref1-shRNA组磷酸化组蛋白H2AX表达增加,caspase 3活性增加,细胞凋亡率增高,细胞活性降低,差异具有统计学意义（P值均＜0.05）.
结论pGenesil-APE/Ref1-shRNA抑制APE/Refl表达后,大鼠体外培养SGC抗氧化损伤能力降低;APE/Ref1可能通过DNA修复功能,实现对SGC的保护作用.
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