【摘 要】
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目的 检测一氧化氮(NO)对ghrelin诱导的大鼠GH3细胞的生长激素(GH)分泌和细胞增殖的影响,探讨NO的作用机制.方法 首先应用ghrelin在不同浓度分别作用2 h;应用ghrelin在工作浓
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院神经外科,武汉,430030华中科技大学同济医学院附属梨园医院神经外科;
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目的 检测一氧化氮(NO)对ghrelin诱导的大鼠GH3细胞的生长激素(GH)分泌和细胞增殖的影响,探讨NO的作用机制.方法 首先应用ghrelin在不同浓度分别作用2 h;应用ghrelin在工作浓度1×10-7mol/L,分别作用不同时间,检测对GH3细胞GH分泌的影响;然后检测NO的供体(SNAP,1×10-5 mol/L)和NO合成酶的抑制剂(NAME,1×10-5mol/L)对ghrelin诱导的GH分泌和细胞增殖的影响;用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测GH水平,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖,Western免疫印迹法检测细胞内信号通路蛋白的活性变化.结果 ghrelin刺激GH3细胞分泌GH呈时间和浓度依赖性(P<0.01),ghrelin明显刺激GH3细胞的增殖(P<0.05);SNAP可抑制基础的和ghrelin刺激的GH分泌(P<0.01),对细胞增殖也有明显影响(P<0.01),而NAME对GH的分泌和细胞增殖无影响;ghrelin可诱导细胞外信号调节激酶(ERK)的活化,SNAP可以抑制这种效应.结论 NO抑制ghrelin诱导GH3细胞GH分泌和细胞增殖,其机制可能阻断了ghrelin激活的ERK信号通路.
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