【摘 要】
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为获得猪流行性腹泻病毒（PEDV）受体猪氨基肽酶N（pAPN）抗原，提取巴马香猪小肠绒毛上皮的总RNA，PCR扩增获得pAPN基因的主要抗原区片段，并将其克隆至原核表达载体pET-32a中，将重组质粒pE
【机 构】
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山东省滨州畜牧兽医研究院,海南省农业科学院畜牧兽医研究所,滨州学院生物工程学院
【基金项目】
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国家自然科学基金地区科学基金项目(31560696);海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室开放课题(HKL201601);滨州学院实验技术研究项目(BZXYSYXM201408)
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为获得猪流行性腹泻病毒（PEDV）受体猪氨基肽酶N（pAPN）抗原，提取巴马香猪小肠绒毛上皮的总RNA，PCR扩增获得pAPN基因的主要抗原区片段，并将其克隆至原核表达载体pET-32a中，将重组质粒pET-32a—pAPN转化大肠埃希菌BL21，通过不同浓度的IPTG、不同诱导时间进行诱导表达，以确定目的蛋白表达的最佳条件。经SDS-PAGE和抗组氨酸标签的单抗进行Western blot检测重组蛋白在大肠埃希菌中的表达，结果显示，原核表达产物在诱导温度37℃、IPTG浓度为0．8mmol／L，诱导4h
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