热休克蛋白gp96-肽复合物的提取及纯化

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目的:建立从H22肝癌细胞中提取、纯化热休克蛋白gp96-肽复合物的方法.方法:①制备H22肝癌细胞蛋白:将H22肝癌细胞裂解、离心、过滤及透析后获得.②gp96-肽复合物的纯化:上述可溶性H22肝癌细胞蛋白经分级硫酸铵盐析后,依次用ConA-Sepharose亲和层析、Sephadex G25更换缓冲液及DEAE-Sephacel离子交换层析分离纯化.③gp96-肽复合物的鉴定和浓度测定:所得蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot进行蛋白分子量及性质鉴定,Lowry法测定蛋白浓度.结
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