【摘 要】
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目的:探讨白藜芦醇对类风湿性关节炎的影响,研究肠道菌群的重塑及其作用机制。方法:选取雄性DBA/1小鼠作为实验对象,采用尾根部皮下注射Ⅱ型胶原与弗氏不完全佐剂混合物的方法诱导小鼠（CIA）模型。将诱导成功的小鼠随机分为CIA模型组、CIA+甲氨蝶呤组、CIA+白藜芦醇低剂量干预组及CIA+白藜芦醇高剂量干预组,每组10只。造模第21天灌胃给予不同剂量白藜芦醇[2、0.5 g/（kg·d）],对照组
【基金项目】
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宁波市自然科学基金项目（2016A610022）；
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目的:探讨白藜芦醇对类风湿性关节炎的影响,研究肠道菌群的重塑及其作用机制。方法:选取雄性DBA/1小鼠作为实验对象,采用尾根部皮下注射Ⅱ型胶原与弗氏不完全佐剂混合物的方法诱导小鼠（CIA）模型。将诱导成功的小鼠随机分为CIA模型组、CIA+甲氨蝶呤组、CIA+白藜芦醇低剂量干预组及CIA+白藜芦醇高剂量干预组,每组10只。造模第21天灌胃给予不同剂量白藜芦醇[2、0.5 g/（kg·d）],对照组给予等量0.9%氯化钠溶液,甲氨蝶呤组给予0.5 g/（kg·d）,连续21 d。采用关节炎分数法对小鼠关节炎症程度进行评分,通过苏木精-伊红染色法（HE）染色评价关节破坏程度,观察各组小鼠关节组织病理变化情况;提取小鼠血清采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6 （IL-6）及白细胞介素-1β（IL-1β）;使用流式细胞术检测免疫小鼠第42天脾脏Treg细胞（Treg）,辅助性T细胞17 （Th17）和CD8+T细胞的变化情况;提取免疫第42天小鼠粪便样品中微生物基因组DNA,采用实时PCR （RT-PCR）定量分析拟杆菌、乳杆菌、双歧杆菌以及放线菌的丰度;分析各组小鼠肠道菌群结构差异与T细胞的相关性,阐明肠道菌群对Th17/Treg平衡关系的调控。结果:与CIA模型组比较,CIA+白藜芦醇高、低剂量组均可以降低CIA小鼠血清中炎症因子TNF-α、IL-6及IL-1β的表达（P<0.01）,高剂量组更显著。病理检测表明,高剂量白藜芦醇可以显著改善CIA小鼠的关节病变。RT-PCR检测表明,白藜芦醇可促进拟杆菌和双歧杆菌的生长。流式细胞术及相关性分析等方法明确了重塑肠道菌群可恢复CIA小鼠Th17/Treg细胞之间平衡。结论:白藜芦醇可通过增加拟杆菌、乳杆菌和双歧杆菌的丰度有效改善CIA模型小鼠相关症状。
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