【摘 要】
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本试验旨在研究丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在应激鸭肠上皮屏障功能中的调节作用.取原代鸭小肠上皮细胞,H2O2诱导氧化应激(终浓度50μmol/L).试验分为空白对照组(A组)、阳性对照组(50μmol/L H2O2,B组)和氧化应激基础上添加丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂组(10μmol/L SB203580,C组).使用CCK-8测量细胞活力,细胞电阻仪检测细胞跨膜电阻(TEER),实时荧光定量-聚合酶链式反应(q-PCR)检测氧化应激相关基因和紧密连接蛋白mRNA的表达.结果表明:①与
【机 构】
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湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室,湖北省农业科技创新中心,湖北武汉 430064;西南科技大学生命科学与工程学院,四川绵阳 621010;湖北省农业科学院畜牧兽医
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本试验旨在研究丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在应激鸭肠上皮屏障功能中的调节作用.取原代鸭小肠上皮细胞,H2O2诱导氧化应激(终浓度50μmol/L).试验分为空白对照组(A组)、阳性对照组(50μmol/L H2O2,B组)和氧化应激基础上添加丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂组(10μmol/L SB203580,C组).使用CCK-8测量细胞活力,细胞电阻仪检测细胞跨膜电阻(TEER),实时荧光定量-聚合酶链式反应(q-PCR)检测氧化应激相关基因和紧密连接蛋白mRNA的表达.结果表明:①与A组相比,B组细胞活力下降到80％左右(P<0.05);与B组相比,C组细胞活力提高(P<0.05).②与A组相比,B、C组TEER降低(P<0.05),C组TEER高于B组(P<0.05).③与A组相比,B组Nrf2/HO-1相对表达量升高(P<0.05),C组Nrf2/HO-1相对表达量低于B组(P<0.05).④与A组相比,B组claudin-1、occludin相对表达量较A组降低(P<0.05),C组claudin-1、occludin相对表达量高于B组(P<0.05).由此可见,SB203580在一定程度上能够促进鸭小肠上皮细胞的生长,可有效缓解H2O2引起的氧化损伤,同时增加氧化损伤过程中occludin和claudin-1的表达量,通过增强细胞紧密连接,促进鸭肠上皮屏障功能维持.
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