探讨内质网应激对胶质瘤U87细胞替莫唑胺(TMZ)化疗敏感性的影响及其机制。
方法（1）体外常规培养胶质瘤U87细胞，培养24 h后加入0、12.5、25、50、100 μmol/L TMZ作用24 h，MTT检测细胞增殖抑制率，观察TMZ的半抑制浓度(IC50)；0、2、4、8 μmol/L内质网应激诱导剂衣霉素(TM)处理U87细胞6 h后加入50 μmol/L TMZ作用24 h，MTT检测细胞增殖抑制率的变化；(2)将细胞分为对照组、TM组、TMZ组、TM+TMZ组，TM组、TM+TMZ组细胞加入4 μmol/L TM预处理6 h，后2组细胞加入50 μmol/L TMZ，对照组加入等量培养基。继续作用24 h后流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率；Western blotting检测细胞含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、DNA错配修复酶(MGMT)、内质网腔内分子伴侣(GRP78)、磷酸化肌醇需要酶1(IRE-1)的表达。
结果(1)MTT检测显示TMZ对U87细胞的IC50为50 μmol/L。与0 μmol/L TM+50 μmol/L TMZ组、2 μmol/L TM+50 μmol/L TMZ组比较，4 μmol/L TM+50 μmol/L TMZ组、8 μmol/L TM+50 μmol/L TMZ组细胞增殖抑制率均降低，差异有统计学意义(P<0.05)；(2)与TMZ组比较，TM+TMZ组细胞凋亡率[(46.98±4.79)% vs. (35.74±4.09)%]明显减少，凋亡因子caspase-3和Bax蛋白的表达减少，MGMT、GRP78和IRE-1蛋白的表达增加，差异有统计学意义(P<0.05)。
结论内质网应激可增加胶质瘤U87细胞耐药基因MGMT的表达，降低细胞对TMZ的化疗敏感性，诱发细胞产生化疗抵抗。