【摘 要】
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目的:观察冈田酸诱导大鼠海马神经元(HT22细胞)损伤时神经元微管相关蛋白(Tau蛋白)和凋亡相关因子的变化,探讨鹿茸多肽对神经细胞损伤的保护作用,阐明其相关作用机制.方法:大
【机 构】
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长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心,吉林长春,130117吉林大学基础医学院病原免疫细胞遗传学实验中心,吉林长春,130021;
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目的:观察冈田酸诱导大鼠海马神经元(HT22细胞)损伤时神经元微管相关蛋白(Tau蛋白)和凋亡相关因子的变化,探讨鹿茸多肽对神经细胞损伤的保护作用,阐明其相关作用机制.方法:大鼠HT22细胞体外传代培养,冈田酸诱导HT22细胞损伤.HT22细胞分为正常对照组、DMSO对照组、冈田酸损伤模型组和不同浓度鹿茸多肽组(终浓度分别为50、500及1 000 mg·L-1),37℃、5％CO2孵育24 h.采用免疫细胞化学染色法、Western blotting法和RT-PCR法检测各组细胞中Tau蛋白磷酸化水平及凋亡相关因子Bcl-2和Caspase-3的表达.结果:免疫细胞化学染色法染色,磷酸化Tau蛋白的表达呈棕黄色颗粒,与正常对照组比较,冈田酸损伤模型组细胞中棕黄色颗粒明显增多;与冈田酸损伤模型组比较,500和1 000mg·L-1鹿茸多肽组细胞中棕黄色颗粒明显减少.Western blotting法检测,与冈田酸损伤模型组比较,各浓度鹿茸多肽组细胞中Tau蛋白表达水平明显降低(P＜0.05或P＜0.01),1 000 mg·L-1鹿茸多肽组细胞中Bcl-2表达水平明显升高(P＜0.05),各浓度鹿茸多肽组细胞中Caspase-3表达水平均无明显变化(P＞0.05).RT-PCR法检测,与冈田酸损伤模型组比较,各浓度鹿茸多肽组细胞中Tau mRNA表达水平明显降低、Bcl-2 mRNA表达水平明显升高(P＜0.05或P＜0.01),500和1 000 mg·L-1鹿茸多肽组细胞中Caspase-3 mRNA表达水平明显降低(P＜0.05或P＜0.01).结论:鹿茸多肽可能通过抑制Tau过度磷酸化及抑制细胞凋亡调控机制,对冈田酸诱导的神经细胞损伤起到保护作用.
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