【摘 要】
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目的探讨诱导性多能干细胞源性间充质干细胞(iPSC-MSCs)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化应激损伤的缓解作用及其机制。方法建立人脐静脉内皮
【机 构】
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中山大学附属第一医院心血管医学部; 国家卫生健康委员会辅助循环重点实验室(中山大学); 复旦大学附属中山医院心内科; 广州市第八人民医院;
【基金项目】
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广东省自然科学基金(2014A030313206)
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目的探讨诱导性多能干细胞源性间充质干细胞(iPSC-MSCs)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化应激损伤的缓解作用及其机制。方法建立人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的ox-LDL损伤模型,采取条件培养基预孵育和Transwell装置共培养2种方式发挥iPSC-MSCs的作用;细胞增殖-毒性检测(CCK8)法测定细胞活力,DCFH-ROS荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)水平,Western Blot法测定细胞内烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶4型(NOX4)的蛋白表达,荧光定量PCR检测核因子相关因子2(Nrf2)和血红素氧合酶1(HO-1)的mRNA表达。结果与iPSC-MSCs条件培养基(CM)共孵育后,ox-LDL-HUVEC模型产生的ROS水平明显下降(P<0.05),且下降幅度与iPSC-MSC-CM提取过程中的共孵育时间有关,在共孵育24 h CM(24 hcm)组达到最大(P<0.05);与iPSC-MSCs进行Transwell共培养后,ox-LDL-HUVEC模型细胞活力显著提高(P<0.05),NOX4蛋白表达显著下降(P<0.05),Nrf2和HO-1 mRNA表达明显增加(P<0.05);iPSC-MSCs-Transwell共培养对单HUVEC的NOX4表达无明显影响,但可显著上调其Nrf2和HO-1的mRNA表达水平(P<0.05)。结论 iPSCMSCs可缓解ox-LDL引起的HUVEC细胞活力损害,该过程可能与抑制ROS水平增高,下调NOX4表达及促进Nrf2和HO-1转录增多有关,提示iPSC-MSCs在动脉粥样硬化及氧化应激性疾病方面具有应用前景。
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