【摘 要】
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本文对骨骼肌细胞线粒体分离方法作了二点改进:一是用碱溶液将分离介质——0.25M蔗糖溶液(每升含50000u肝素)的pH调到7.4;二是在离心前将肌肉组织与分离介质的比例按重量与容
【机 构】
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军事医学科学院卫生学环境医学研究所
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本文对骨骼肌细胞线粒体分离方法作了二点改进:一是用碱溶液将分离介质——0.25M蔗糖溶液(每升含50000u肝素)的pH调到7.4;二是在离心前将肌肉组织与分离介质的比例按重量与容积比由1:8增至1:16(g:ml),使沉淀分层更完全,提高了线粒体的产量与纯度,并且将离心次数从4次减到2次,缩短了分离时间。所分离的骨骼肌细胞线粒体经电镜形态学观察和氧电极极谱法测定呼吸活性,显示线粒体结构和功能完整,呼吸控制率(RCR)和氧化磷酸化效率(ADP/O)分别为5.50±0.29和3.41±0.06(n=8)。经改进后的方法在缺钾动物急性热暴露实验中应用获得了较满意的结果。
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