富血小板血浆和弗林蛋白酶激动剂对大鼠膝骨关节炎的缓解作用实验研究

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目的:探究富血小板血浆(PRP)和弗林蛋白酶(Furin)激动剂对SD大鼠膝骨关节炎(KOA)的影响。方法:(1)体内实验部分,通过手术离断SD大鼠前交叉韧带建立KOA模型;实验组(10只)关节腔隔天注射0.5 ml激活后的PRP,对照组(模型组,10只)和假手术组(10只)关节腔隔天注射0.9%氯化钠溶液0.5 ml,持续4周;取大鼠膝关节组织采用HE、甲苯胺蓝和番红固绿染色显示病理损伤,采用免疫组化染色检测软骨蛋白聚糖抗体(ADAMTS)-5和白细胞介素(IL)-1β两种相关抗体的表达。(2)体外实验部分,采用脂多糖(LPS)诱导关节软骨细胞炎症模型,用递增浓度PRP和Furin激动剂干预LPS处理的SD大鼠软骨细胞,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测相关基因[基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-13、IL-6、ADAMTS-4、ADAMTS-5、IL-1β和环氧化酶(COX)-2、聚蛋白多糖(ACAN)和Ⅱ型胶原A1(COL2A1)]mRNA的表达,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)水平。结果:(1)体内实验部分,膝关节大体观及病理切片染色结果均显示,与对照组相比,实验组关节软骨病理损伤程度明显减轻。(2)体外实验部分,ELISA结果显示,加入LPS后IL-1β、IL-6、TNF-α、iNOS浓度显著增加,加入不同浓度PRP后各炎症因子浓度随着PRP浓度的增加呈下降趋势,加入Furin激动剂后各炎症因子浓度亦有所下降(均P<0.05);RT-PCR结果显示,加入LPS后MMP-3、MMP-13、IL-6、ADAMTS-4、ADAMTS-5、IL-1β和COX-2的mRNA表达增加,ACAN和COL2A1的mRNA表达下降(均P<0.05),而加入不同浓度PRP和Furin激动剂后上述指标有所修复。结论:PRP和Furin激动剂对SD大鼠KOA均有明显的缓解作用。
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