【摘 要】
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目的:探索初级纤毛是否为PC12细胞的细胞外氧感受器。方法:通过小干扰RNA(siRNA)干扰细胞纤毛内转运蛋白88的表达抑制体外培养PC12细胞初级纤毛的发生;免疫荧光染色法观察缺
【机 构】
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兰州军区兰州总医院全军骨科中心骨科研究所,兰州军区兰州总医院全军高原损伤防治重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金(81571847,81402848);全军医药卫生科研基金(CLZ14JA01);兰州军区高原科研攻关项目(LZ13GY07)
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目的:探索初级纤毛是否为PC12细胞的细胞外氧感受器。方法:通过小干扰RNA(siRNA)干扰细胞纤毛内转运蛋白88的表达抑制体外培养PC12细胞初级纤毛的发生;免疫荧光染色法观察缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、核因子E2相关因子2(Nrf2)核转位和PC12细胞初级纤毛生长情况;实时定量RT-PCR法检测HIF-1α、Nrf2、血管内皮生长因子(VECF)和超氧化物歧化酶(SOD)基因表达。结果:siRNA干扰组细胞的初级纤毛被抑制。与常氧对照组比较,缺氧对照组和阴性对照组细胞的HIF-1α和Nrf2发生了明显的核转位,细胞内HIF-1α、Nrf2、VEGF基因表达量增加,SOD表达量下降;siRNA干扰组细胞在缺氧状态下HIF-1α和Nrf2未发生核转位,细胞内HIF-1α、Nrf2、VEGF基因表达受到抑制,而SOD表达量升高。结论:PC12细胞的初级纤毛可能具有细胞外氧感受器的作用,可以感知细胞外环境中的缺氧和氧化应激状态,并通过一定途径将缺氧信号传导至细胞内,进而启动细胞抗缺氧机制。
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