【摘 要】
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目的建立一种测定脐带血25-羟基维生素D2[25(OH)D2]和25-羟基维生素D3[25(OH)D3]浓度的方法。方法脐带血血清样本前处理采用饱和硫酸锌和乙腈的蛋白沉淀法。采用液相色谱串联
【机 构】
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上海交通大学医学院附属新华医院环境与儿童健康教育部和上海市重点实验室
【基金项目】
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上海市科学技术委员会资助项目(13430710300)
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目的建立一种测定脐带血25-羟基维生素D2[25(OH)D2]和25-羟基维生素D3[25(OH)D3]浓度的方法。方法脐带血血清样本前处理采用饱和硫酸锌和乙腈的蛋白沉淀法。采用液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)测定25(OH)D2和25(OH)D3浓度。固定相为Poroshell120 EC-C18正向柱;电喷雾离子源(ESI);多反应监测模式(MRM);喷雾电压35.0 psi;喷雾温度180℃;鞘气温度350℃;鞘气流速11.0 L/min。以甲醇(80%)、超纯水(20%)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.5 m L/min,柱温为50℃;质谱采用高温ESI,以选择反应监测模式进行定量分析。结果 25(OH)D2和25(OH)D3在3.125~100μg/L范围内呈良好的线性关系(R2=0.998 7、0.999 1)。血样冻融3次进行检测,日内、日间相对标准偏差(RSD)均<15%。对血清25-(OH)D2和25(OH)D3质控品进行检测,结果均符合要求。结论 LC-MS/MS敏感性高,分析时间短,适用于脐带血25(OH)D2和25(OH)D3浓度检测。
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