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摘 要：本文采用高校液相测定了柴连口服液中盐酸麻黄碱的含量，固定相为：安捷伦Cl8（4.6mm×250mm，5μm），甲醇-0.092%磷酸溶液（含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺）（1.5∶98.5）为流动相，检测波长为210nm，流速1.0mL·min-1，柱温：30℃。盐酸麻黄碱在10～160μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。盐酸麻黄碱的平均回收率为99.1%;此方法简便、准确、重现性好，可用于柴连口服液中盐酸麻黄碱的含量测定。
关键词：柴连口服液;盐酸麻黄碱;含量
柴连口服液具有解表宣肺，化湿和中的功效，由麻黄、柴胡、蔗糖、阿司帕坦、聚山梨酯80、广藿香、肉桂、连翘、桔梗组成。柴连口服液用于感冒属风寒、风寒挟湿证者。《本草经疏》记载：“表虚自汗，阴虚盗汗;肺虚有热，多痰咳嗽以致鼻塞;疮疤热甚，不因寒邪所郁而自倒靥;虚人伤风，气虚发喘;阴虚火炎，以致眩晕头痛;南方中风瘫痪，及平日阳虚腠理不密之人皆禁用。”麻黄含有丰富的生物碱，是提取麻黄碱的主要资源。麻黄已有两千多年的药用历史，用于伤风感冒、咳嗽气喘、风湿痹痛及阴疽、咳痰等病症。麻黄及麻黄碱也用于减肥，但对人的身体有极大的害处，甚至致人于死[1]。本文采用高校液相对柴连口服液中盐酸麻黄碱含量方法进行研究。
1 仪器与试药
莱伯泰科LC600高效液相色谱仪（北京莱伯泰科仪器股份有限公司）、梅特勒ME204E分析天平（上海楚柏实验室设备有限公司）、C18保护柱芯（天津琛航科苑科技发展有限公司）、优普杜伯特UP-DBT-II实验室洗瓶机（杜伯特（北京）科技有限公司）、英国艾德姆衡器AVT减震天平台（艾德姆衡器（武汉）有限公司）、DC-0506上海汗诺低温恒温循环水槽（上海汗诺仪器有限公司）、UPH标准型超纯水器（四川优普超纯科技有限公司）、通微EasySep-1020高效液相色谱仪（上海通微分析技术有限公司）。乙腈（西安嘉博盈生物科技有限公司）、氨水（西安嘉博盈生物科技有限公司）、甲醇（西安嘉博盈生物科技有限公司）、冰醋酸（西安嘉博盈生物科技有限公司）、三乙胺（德州同威新材料科技有限公司）、磷酸二氢钾（德州同威新材料科技有限公司）、乙醚（德州同威新材料科技有限公司）、磷酸（上海盈公生物技术有限公司）、乙胺（德州同威新材料科技有限公司）、二正丁胺（德州同威新材料科技有限公司）、醋酸钠（德州同威新材料科技有限公司）、磷酸二氢铵（德州同威新材料科技有限公司）。
2 含量测定
2.1 色谱条件：依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[2-6]。色谱柱为安捷伦Cl8规格为（4.6mm×250mm，5μm）;甲醇-0.092%磷酸溶液（含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺）（1.5∶98.5）为流动相;检测波长为210nm。理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不得低于2000。
2.2 供试品溶液的制备
取柴连口服液，精密量取，用浓氨调pH至9，乙醚提取4次，每次15mL，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇适量溶解，滤过，用甲醇定容至5mL量瓶中，摇匀，备用。
2.3 对照品溶液的制備
精密称取盐酸麻黄碱对照品约20mg，用流动相溶解并稀释成每1ml中含20μg的溶液，作为对照溶液。
2.4 准曲线的制备
制备浓度为10、20、40、80、120、160μg·mL-1的对照品溶液，分别精密吸取10μL注入HPLC，记录色谱图。以峰面积积分值A（μg）为横坐标，进样量为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试验表明，盐酸麻黄碱对照品在10～160μg·mL-1范围内线性关系良好。
2.5 精密度试验
依照2.3项下制备对照品溶液，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD为0.86%。结果表明，本实验精密度良好。
2.6 重现性试验
分别称取同批柴连口服液样品6份，分别依照2.3项下供试品制0.77%，结果表明，此含量测定方法的重现性良好。
2.7 稳定性试验
依照2.3项下供试品制备方法制备供试品溶液，分别在0，2，4，6小时精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，进样测定，供试品盐酸麻黄碱峰面积积分值的RSD为0.83%。结果表明盐酸麻黄碱至少在6小时内稳定。
2.8 回收率试验
采用加样回收试验，共测定六份样品。
2.9 样品含量测定
依照上述含量测定方法，测定柴连口服液三批样品。
3 讨论
分别考察含水-甲醇-冰醋酸（20∶80∶0.05），0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈-冰醋酸（70：30：1），水-乙腈-三乙胺（80∶20：0.01），甲醇-0.092%磷酸溶液（含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺）（5∶95），乙腈-0.02mol·L-1磷酸二氢钾溶液（含0.2%三乙胺和0.1%磷酸）（30∶70），不同比例的流动相，结果以甲醇-0.092%磷酸溶液（含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺）（1.5∶98.5）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用甲醇-0.092%磷酸溶液（含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺）（1.5∶98.5）为流动相。此方法简便、准确、重现性好，可用于柴连口服液中盐酸麻黄碱的含量测定。
参考文献
[1]麻黄及麻黄碱在减肥和提高竞技水平方面的临床效果及其副作用[J].Paul Shekelle，Mary Hardy，Sally C.Morton，Margaret Maglione，Marika Suttorp，Elizabeth，Roth Lara Jungrig，Walter A.Mojica，James Gagné，Eileen Mekinnon，袁芳.中国循证医学杂志，2004（09）.
[2]卫平，郑芳昊，霍慧灵，陈飞龙，罗佳波.不同配伍比例对麻黄-甘草药对中麻黄类生物碱成分血浆药动学的影响[J].中国实验方剂学杂志，2016（07）.
[3]刘睿，王宁，刘志辉.RP-HPLC同时测定宣肺止咳口服液中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱及苦杏仁苷含量[J].中国实验方剂学杂志，2011（16）.
[4]曾永长，张莉，曾晓燕，陈艺文.HPLC法测定馥感啉口服液中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量[J].中药新药与临床药理，2015（02）.
[5]黎春彤，李翔，马建丽，冯春景，刘皈阳.HPLC同时测定防风通圣丸中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量[J].药物分析杂志，2016（01）.
[6]金丽，康娟娟，伍小勇，杭娟，张心悦，张晓丹.高效液相色谱法同时测定呋麻滴鼻液中盐酸麻黄碱和呋喃西林含量[J].中南药学，2017（12）.
关键词：柴连口服液;盐酸麻黄碱;含量
柴连口服液具有解表宣肺，化湿和中的功效，由麻黄、柴胡、蔗糖、阿司帕坦、聚山梨酯80、广藿香、肉桂、连翘、桔梗组成。柴连口服液用于感冒属风寒、风寒挟湿证者。《本草经疏》记载：“表虚自汗，阴虚盗汗;肺虚有热，多痰咳嗽以致鼻塞;疮疤热甚，不因寒邪所郁而自倒靥;虚人伤风，气虚发喘;阴虚火炎，以致眩晕头痛;南方中风瘫痪，及平日阳虚腠理不密之人皆禁用。”麻黄含有丰富的生物碱，是提取麻黄碱的主要资源。麻黄已有两千多年的药用历史，用于伤风感冒、咳嗽气喘、风湿痹痛及阴疽、咳痰等病症。麻黄及麻黄碱也用于减肥，但对人的身体有极大的害处，甚至致人于死[1]。本文采用高校液相对柴连口服液中盐酸麻黄碱含量方法进行研究。
1 仪器与试药
莱伯泰科LC600高效液相色谱仪（北京莱伯泰科仪器股份有限公司）、梅特勒ME204E分析天平（上海楚柏实验室设备有限公司）、C18保护柱芯（天津琛航科苑科技发展有限公司）、优普杜伯特UP-DBT-II实验室洗瓶机（杜伯特（北京）科技有限公司）、英国艾德姆衡器AVT减震天平台（艾德姆衡器（武汉）有限公司）、DC-0506上海汗诺低温恒温循环水槽（上海汗诺仪器有限公司）、UPH标准型超纯水器（四川优普超纯科技有限公司）、通微EasySep-1020高效液相色谱仪（上海通微分析技术有限公司）。乙腈（西安嘉博盈生物科技有限公司）、氨水（西安嘉博盈生物科技有限公司）、甲醇（西安嘉博盈生物科技有限公司）、冰醋酸（西安嘉博盈生物科技有限公司）、三乙胺（德州同威新材料科技有限公司）、磷酸二氢钾（德州同威新材料科技有限公司）、乙醚（德州同威新材料科技有限公司）、磷酸（上海盈公生物技术有限公司）、乙胺（德州同威新材料科技有限公司）、二正丁胺（德州同威新材料科技有限公司）、醋酸钠（德州同威新材料科技有限公司）、磷酸二氢铵（德州同威新材料科技有限公司）。
2 含量测定
2.1 色谱条件：依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[2-6]。色谱柱为安捷伦Cl8规格为（4.6mm×250mm，5μm）;甲醇-0.092%磷酸溶液（含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺）（1.5∶98.5）为流动相;检测波长为210nm。理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不得低于2000。
2.2 供试品溶液的制备
取柴连口服液，精密量取，用浓氨调pH至9，乙醚提取4次，每次15mL，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇适量溶解，滤过，用甲醇定容至5mL量瓶中，摇匀，备用。
2.3 对照品溶液的制備
精密称取盐酸麻黄碱对照品约20mg，用流动相溶解并稀释成每1ml中含20μg的溶液，作为对照溶液。
2.4 准曲线的制备
制备浓度为10、20、40、80、120、160μg·mL-1的对照品溶液，分别精密吸取10μL注入HPLC，记录色谱图。以峰面积积分值A（μg）为横坐标，进样量为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试验表明，盐酸麻黄碱对照品在10～160μg·mL-1范围内线性关系良好。
2.5 精密度试验
依照2.3项下制备对照品溶液，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD为0.86%。结果表明，本实验精密度良好。
2.6 重现性试验
分别称取同批柴连口服液样品6份，分别依照2.3项下供试品制0.77%，结果表明，此含量测定方法的重现性良好。
2.7 稳定性试验
依照2.3项下供试品制备方法制备供试品溶液，分别在0，2，4，6小时精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，进样测定，供试品盐酸麻黄碱峰面积积分值的RSD为0.83%。结果表明盐酸麻黄碱至少在6小时内稳定。
2.8 回收率试验
采用加样回收试验，共测定六份样品。
2.9 样品含量测定
依照上述含量测定方法，测定柴连口服液三批样品。
3 讨论
分别考察含水-甲醇-冰醋酸（20∶80∶0.05），0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈-冰醋酸（70：30：1），水-乙腈-三乙胺（80∶20：0.01），甲醇-0.092%磷酸溶液（含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺）（5∶95），乙腈-0.02mol·L-1磷酸二氢钾溶液（含0.2%三乙胺和0.1%磷酸）（30∶70），不同比例的流动相，结果以甲醇-0.092%磷酸溶液（含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺）（1.5∶98.5）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用甲醇-0.092%磷酸溶液（含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺）（1.5∶98.5）为流动相。此方法简便、准确、重现性好，可用于柴连口服液中盐酸麻黄碱的含量测定。
参考文献
[1]麻黄及麻黄碱在减肥和提高竞技水平方面的临床效果及其副作用[J].Paul Shekelle，Mary Hardy，Sally C.Morton，Margaret Maglione，Marika Suttorp，Elizabeth，Roth Lara Jungrig，Walter A.Mojica，James Gagné，Eileen Mekinnon，袁芳.中国循证医学杂志，2004（09）.
[2]卫平，郑芳昊，霍慧灵，陈飞龙，罗佳波.不同配伍比例对麻黄-甘草药对中麻黄类生物碱成分血浆药动学的影响[J].中国实验方剂学杂志，2016（07）.
[3]刘睿，王宁，刘志辉.RP-HPLC同时测定宣肺止咳口服液中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱及苦杏仁苷含量[J].中国实验方剂学杂志，2011（16）.
[4]曾永长，张莉，曾晓燕，陈艺文.HPLC法测定馥感啉口服液中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量[J].中药新药与临床药理，2015（02）.
[5]黎春彤，李翔，马建丽，冯春景，刘皈阳.HPLC同时测定防风通圣丸中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量[J].药物分析杂志，2016（01）.
[6]金丽，康娟娟，伍小勇，杭娟，张心悦，张晓丹.高效液相色谱法同时测定呋麻滴鼻液中盐酸麻黄碱和呋喃西林含量[J].中南药学，2017（12）.