近年来,随着抗生素的不断应用,细菌耐药性问题引起广泛关注。细菌耐药性是一个全球化的公共卫生安全问题,动物园动物种类众多,人流密集,是耐药细菌的储存库。动物园的所处的区位和人类活动密切相关,动物园内的细菌耐药性分布对当地的公共卫生安全显得十分重要。本研究从人流量密集的广东某地动物园入手调查园区细菌内耐药性,分析其耐药情况,为公共卫生安全提供数据支撑,同时也为控制耐药传播提供理论依据。试验样本从动物园的四个区域采集,选取袋鼠区、灵长动物区、熊猫区和黑天鹅区采集动物粪便、土壤、水等环境样品以及饲养员粪便样品74份,共分离大肠杆菌66株,肺炎克雷伯菌8株。采用琼脂稀释法测定不同抗菌药物的最小抑菌浓度,结果表明动物园分离的大肠杆菌对头孢菌素类、酰胺醇类、喹诺酮类等多种抗菌药物耐药。不同区域分离的大肠杆菌对各种抗菌药的耐药率不尽相同,比如对头孢喹肟耐药率,黑天鹅区域高达80%（28/35）,袋鼠区域也有47.6%（8/17）,而灵长动物区则只有23.08%（3/13）,这可能与它们的用药经历有关。值得注意的是,灵长动物区分离的大肠杆菌黏菌素耐药率高,达到61.2%（13/20）。采用PCR的方法对mcr-1、bla_CTX-M、oqxAB以及floR等耐药基因进行了检测,结果发现灵长动物区的熊猴、土壤以及饲养员等样品中都检出了mcr-1基因,检出率为76.74%（13/17）。oqxAB、floR、bla_CTX-M则在其他来源的样品中检出。其它采样区中检测出其中bla_CTX-M在黑天鹅区的检出率高达80%（28/35）,在袋鼠区也有47.06%（8/17）的检出率,但是以上两个区域均未检出mcr-1。针对携带mcr-1基因的菌株进行PFGE以及聚类分析,发现来自于灵长区饲养员和熊猴分离的携带mcr-1的大肠杆菌亲缘关系较近,提示耐药菌可能在饲养员和熊猴之间相互传播。对13株mcr-1阳性菌进行接合转移试验,得到5株结合子。S1-PFGE和Southern杂交结果显示mcr-1位于大小各异的质粒上,提示mcr-1可以通过各种可移动元件进行转移。本实验研究结果表明在该动物园分离大肠杆菌耐药性十分普遍,不同区域分离的细菌耐药率存在差异性,可能与用药习惯有关。不同复制子型质粒可能介导了mcr-1的转移,但是部分携带mcr-1菌株可能在饲养员和动物之间相互传播。综合以上,应给予该动物园圈养动物的细菌耐药性问题以高度重视,更大规模的调查应该持续开展。