论文部分内容阅读
红树莓果实所具有药用价值和保健价值,与其富含具有生物活性的多酚物质密切相关。本文研究了菲尔杜德和宝石红两种红树莓多酚的提取、分离纯化工艺条件,分析了其多酚组成成分,并探讨了两种红树莓多酚的体外清除自由基的活性和抗脂质过氧化活性,得到的主要结论如下: 1.采用单因素试验及L9(34)正交试验优化醇法提取红树莓多酚的工艺参数,同时采用邓肯多重范围检验法检验不同处理间的差异显著性。结果表明,菲尔杜德红树莓多酚的最佳提取工艺参数为:乙醇体积分数70%(pH6)、提取温度45℃、料液比1:6(g/mL)、提取时间3.5 h、提取2次;宝石红红树莓多酚的最佳提取工艺参数为:乙醇体积分数65%(pH6)、提取温度45℃、料液比1:5(g/mL)、提取时间3.5 h、提取2次。在此条件下,两种红树莓多酚含量分别为(373.78±4.08)mg/100 g、(287.08±4.91)mg/100 g。该工艺可靠、稳定,具有一定的参考价值。 2.比较了6种不同型号大孔树脂对两种红树莓多酚的吸附和解吸效果的差异,结果表明 X-5大孔树脂是分离纯化红树莓多酚的理想树脂。X-5大孔树脂分离纯化红树莓多酚提取液的最优条件为:对于菲尔杜德红树莓多酚提取液,采用径高比1:14,上样浓度1.4 mg/mL,上样量100 mL,样液pH=3的条件进行动态吸附,吸附率为(95.76±2.47)%,吸附量为(9.47±0.94) mg/g;吸附饱和平衡后,先用500 mL的蒸馏水洗杂,再用200 mL pH=6的70%乙醇溶液,以1.0 BV/h的流速进行动态洗脱,解吸率为(91.38±3.03)%回收率为(87.76±1.13)%。对于宝石红多酚提取液,采用径高比1:14,上样浓度1.4 mg/mL,上样量100 mL,样液p H=4的条件进行动态吸附,吸附率为(93.37±2.04)%,吸附量为(8.63±1.48) mg/g;吸附平衡后,先用500 mL的蒸馏水洗杂,再用200 mL p H=6的70%乙醇溶液,以1.0 BV/h的流速进行动态洗脱,解吸率为(93.91±1.88)%,回收率为(90.16±2.38)%。 按照优化后的条件用X-5大孔树脂能有效纯化红树莓多酚,经过纯化后,菲尔杜德红树莓多酚提取液的纯度由(3.94±0.28)%提高至(35.79±2.17)%;宝石红红树莓多酚提取液的纯度由(2.44±0.072)%提高至(26.43±0.67)%。说明X-5大孔树脂对红树莓多酚物质具有较好的纯化、富集作用。 3.紫外光谱分析表明,两种红树莓多酚在200~300 nm波长区域内有黄酮、花色苷物质的特征吸收峰;在500~600 nm波长区域内也有花色苷的特征吸收峰。初步判断红树莓多酚提取液中含有黄酮、花色苷物质。傅里叶红外光谱分析表明,菲尔杜德和宝石红红树莓多酚在3400 cm-1附近和1300~900 cm-1区域有糖类物质的C?O伸缩振动吸收峰,两种红树莓多酚在1753 cm-1附近有黄酮类物质的羰基C═O伸缩振动吸收峰;红外光谱图可初步确认菲尔杜德和宝石红红树莓多酚提取物中含有黄酮类、糖苷类物质,且经过X-5大孔树脂纯化后,能除去部分糖苷类物质。高效液相色谱法分析表明,两种红树莓多酚的液相色谱图出峰较多,说明其组成成分复杂,通过将红树莓多酚样品中各出峰时间与标准品进行对比,初步判断这两种红树莓多酚中有原花青素B2、芦丁、水杨酸和鞣花酸这4种多酚成分。 4.采用4个体外抗氧化指标研究了菲尔杜德和宝石红红树莓多酚粗提液和3段纯化液的体外清除自由基的抗氧化能力。研究结果表明:两种红树莓多酚的粗提液和三段纯化液具有较强的总还原能力,且对OH?、DPPH?和ABTS+·具有较强清除能力,但具有差异性。两种红树莓多酚对DPPH?的清除能力最强,其次为ABTS+·,而对OH?的清除能力相对较弱些。结果表明两种红树莓多酚具有较强的清除自由基的抗氧化能力,同时,两种红树莓多酚的粗提液和三段纯化液的抗氧化能力具有差异性,但具体的差异性在本试验中无法比较;且菲尔杜德红树莓多酚的抗氧化活性强于宝石红红树莓多酚。 采用3个体外抗脂质过氧化指标研究了菲尔杜德和宝石红红树莓多酚粗提液和第一段纯化液的体外抗脂质过氧化活性。研究结果表明,在一定浓度范围内,两种红树莓多酚的粗提液和第一段纯化液具有一定的体外抗脂质过氧化活性,但具有差异性。同时菲尔杜德红树莓多酚的体外抗脂质过氧化活性强于宝石红红树莓多酚,且菲尔杜德红树莓多酚粗提液的体外抗氧化活性强于纯化液。