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建立稳定、高效的梨的不定器官(不定芽、不定胚)再生体系是梨转基因成功的关键环节。为此,本研究分别以‘金花’(Pyrus brestchneideri Rehd.cv.Jinhua)、‘苍溪’(P.pyrifolia Naki.cv.Cangxi)、‘金水’(P.pyrifolia cv.Jinshui)的不同发育时期的胚为外植体,实验采用正交设计并结合SPSS统计分析软件包对实验结果进行分析,探讨了最佳取材时间、不定芽增殖培养及不定芽生根培养基配方及条件,并在此基础上研究了暗培养时间、硝酸银浓度以及不同生长素种类对不定器官再生的影响。其实验结果表明: (1) 取材时期:通过考虑污染率、死亡率、褐化率分析表明,三个品种的最佳取材时期是在第四次即谢花后60天左右,但各个时期取材培养的结果不一致。 (2) 通过考察不定芽再生率、平均每叶芽数两个指标,三个品种的最适不定芽诱导培养基和再生率分别是: ‘金花’:NN69+NAA 0.2mg/L+BA3.0 mg/L,不定芽诱导率为83.41%; ‘金水’:AS+NAA 0.5mg/L+BA 2.0mg/L,不定芽诱导率为76.60%。 ‘苍溪’:MS+NAA 1.0mg/L+BA 3.0mg/L,不定芽诱导率为70.74%。 (3) NAA、IBA、2,4-D三种生长素对梨胚不定芽再生的诱导结果表明:NAA的诱导效果优于IBA与2,4-D。在0.5~2.0mg/L浓度范围内,以IBA代替2,4-D时,不定芽再生率提高了6.21%~21.24%;以NAA代替IBA不定芽再生率提高了36.74%~67.14%。 (4) ‘金花’子叶暗培养21天可以将子叶不定芽发生率由72.11%提高到85.24%;但随着暗培养时间的延长不定芽发生率由72.11%降到58.01%。 (5) AgNO3对‘金花’、‘苍溪’的子叶不定芽再生有明显的促进作用,其最适浓度分别为2mg/L和8mg/L。 (6) 通过考察增殖倍数,三个品种的最佳增殖培养基和增殖倍数分别是: ‘金花’:MS+6-BA 2.0mg/L+IBA 0.2mg/L,增殖倍数为5.94; ‘金水’:MS+6-BA 1.0mg/L+IBA 0.1mg/L,增殖倍数为5.63; ‘苍溪’:MS+6-BA 2.0mg/L+IBA 0.1mg/L,增殖倍数为4.79。 (7) 结合生根率、平均根数、平均根长三个指标分析表明,三个品种的最佳生根条件分别是:‘余花’:1/3MS、N从0.smg/L+IBA 2.0:ng/L+AC 0.smg/L;最高生根率为66.7%; ‘金水’:1/ZMS州AA 1 .Omg/L+工BA 2.0I’ng/L+AC 0.smg/;最高生根率为56.92%; ‘苍溪’:l/4MS一“粥A 2.0 mg/L+AC 0.5 mg/L;最高生根率为63.16%。