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枇杷（Eriobotryajaponica Lindl.）是原产我国的亚热带冷敏水果，属非跃变型果实，根据果肉颜色可以分为白肉枇杷和红肉枇杷两大类。红肉枇杷果实在采后冷藏过程中易发生果肉木质化现象，表现为果肉硬度上升和木质素积累，严重影响果实商品性。本论文研究了EjAP2-1、EjHSF3及其相关转录复合体参与枇杷果实冷害木质化调控的生物学机制，为枇杷采后贮藏及木质化调控提供了理论依据。主要结果如下: 1.筛选获得枇杷冷害木质化相关的AP2/ERF基因家族成员。利用枇杷RNA-Seq数据库，克隆得到18个AP2/ERF基因，其基因表达对低温响应各异，其中EjERF8和EjERF16(激活型AP2/ERF)的表达受程序性降温(LTC)处理抑制，与果肉木质化呈正相关关系;EjERF7和EjAP2-1(抑制型AP2/ERF)的表达受LTC处理诱导，与果肉木质化呈负相关关系。进一步利用双荧光素酶体系，明确仅EjAP2-1可转录抑制木质素合成结构基因Ej4CL1启动子活性，表明EjAP2-1可能负调控枇杷冷害木质化。 2.解析了EjAP2-1转录调控枇杷果实木质化的生物学机制。酵母双杂(Y2H)和双分子荧光互补(BiFC)实验结果显示EjAP2-1和EjMYB1/2存在蛋白互作，且双荧光素酶实验结果表明EjAP2-1与EjMYB1/2存在协同转录调控效应，即EjAP2-1抑制EjMYB1对木质素合成的激活效应，并可增强EjMYB2的抑制效应。进一步利用基因定点突变技术，将EjAP2-1的2个EAR结构域进行突变（mEjAP2-1），结果表明，mEjAP2-1丧失与EjMYB1/2的转录协同效应，但EAR突变并不影响mEjAP2-1与EjMYB1/2的蛋白互作。因此，EjAP2-1参与枇杷果实冷害木质化可能是通过与EjMYB1/2蛋白互作实现，EAR是EjAP2-1抑制功效的源头，而EjMYB1/2则行使抑制信号传递功能。 3.明确了EjHSF3协同EjAP2-1参与调控枇杷果实木质化的生物学机制。利用枇杷RNA-Seq数据库，分离得到了8个热激蛋白基因(EjHsp70-1/2、EjsHsp1/2/3/4/5/6)和3个热响应因子（EjHSF1、EjHSF2和EjHSF3）。研究结果表明，EjHsp与EjHSF1具有协同表达模式，并响应热激处理(HT)，同时EjHSF1能转录调控EjHsp的启动子。推测HT处理通过激活EjHSF1，进而转录调控EjHsp，诱导提高枇杷抗冷性，即EjHSF1-EjHsp-抗冷性通路。EjHSF3不响应HT，但受LTC处理抑制，并能正向调控木质素合成结构基因Ej4CL1启动子的活性。同时，EjHSF3能与EjAP2-1发生蛋白互作，进而协同调控枇杷果实木质化。 综上所述，本文研究发现了两个参与调控枇杷果实冷害木质化的新型转录因子，即EjAP2-1和EjHSF3，两者参与果实冷害木质化的机制各不相同，同时两者也存在蛋白-蛋白互作的关系。上述结果进一步丰富了枇杷果实冷害木质化调控的分子生物学机制。