枯草芽孢杆菌通过超声破壁、（NH₄）₂SO₄分段盐析、DEAE-Sepharose FF离子交换层析、Blue Sepharose CL-6B亲和层析、Sephadex G-200凝胶过滤等纯化步骤，分离出6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G6PD）。经PAGE和SDS-PAGE检测为单一蛋白区带，比活力为1.7375IU／mg，纯化倍数为72.7,收率为13.6％。凝胶过滤法测定该酶表观分子量约为220kD，SDS-PAGE测定亚基分子量约为50.5kD，可见该酶是由四个相同亚基构成的四聚体。等电聚焦电泳测得等电点为6.3，用动力学方法测得该酶的最适反应pH为8.5，最适反应温度为37℃，以6-磷酸葡萄糖（G6P）为底物的Km值为0.177mmol／L。 考察了部分金属离子及EDTA对该酶活性和紫外、荧光光谱的影响：Mg²⁺起激活作用；Zn²⁺低浓度时表现激活作用，高浓度时表现抑制作用；Ag⁺、Fe²⁺起抑制作用；而EDTA和Mn²⁺基本无影响。部分金属离子使G6PD的构象发生改变，发色团所处的微环境随之发生变化，使紫外吸收峰变宽变平。Ag⁺和Fe²⁺引起色氨酸（Trp）残基的荧光淬灭；Mg²⁺和EDTA均使G6PD的荧光强度增强，说明它们使Trp残基重新包裹在分子内部而处于疏水的微环境中；Zn²⁺和Mn²⁺均使G6PD的荧光强度变小，说明它们使酶分子构象变得疏松，原来处在分子内部的发色团暴露在极性环境中。 天然G6PD的远紫外圆二色谱显示在208nm和222nm两处的双负峰曲线，说明α-螺旋含量高，此时含有41.2％的α-螺旋，20.6％的β-折叠和38.2％的无规卷曲及其它构象单元。 用常见的荧光淬灭剂丙烯酰胺和KI研究G6PD分子中Trp残基的微环境，发现它们对分子中T印残基的荧光均有淬灭作用，丙烯酸胺能淬灭100%的荧光，Kl能淬灭78%的荧光，表明分子中小部分饰残基埋藏在分子内部，大部分T印残基处于分子表面的极性环境中。