目的:本实验从水通道蛋白的角度,探讨不同剂量的龟甲胶对肾阴虚病理模型大鼠的影响,旨在丰富肾阴虚证的生理病理学说,为进一步阐明龟甲胶对肾阴虚证的药理作用提供一定的理论基础和部分实验依据。方法:本实验采用60只SD大鼠,体重为200g,随机分为正常组、模型组、试验组(龟甲胶低、中、高剂量组)及阳性组(六味地黄丸组),每组10只,以甲状腺素片为造模药物制备肾阴虚大鼠模型,采用边造模边给药的方法,上午灌胃甲状腺素片,下午灌胃龟甲胶或六味地黄丸,连续给药21天。实验期间观察大鼠的一般体征,包括给药前后各组大鼠体重,精神状态、毛色的光泽度等;末次给药后记录各组大鼠24小时饮水量、进食量及尿量,检测大鼠的肛温;实验结束后,采用Elisa法检测各组大鼠血清中AQP1、AQP2、AVP、c AMP、c GMP的含量,HE染色法检测各组大鼠肾组织的病理改变,免疫组化法检测各组大鼠肾组织中AQP1、AQP2蛋白的表达,荧光定量PCR检测各组大鼠肾组织中AQP1m RNA、AQP2m RNA的表达。结果:1、一般体征:龟甲胶可以改善大鼠的一般体征。龟甲胶剂量组大鼠精神状况可,毛发有光泽,无竖毛弓背现象,未出现打斗行为;大鼠体重升高(P<0.01),肛温及24h饮水量减少、尿量增加(P<0.01),进食量降低(P<0.05)。2、大鼠血清中c AMP、c GMP的含量:龟甲胶中、高剂量组及六味地黄丸组中血清c AMP含量及c AMP/c GMP比值低于模型组(P<0.01),龟甲胶中、高剂量组及六味地黄丸组中血清c GMP含量高于模型组(P<0.01)。3、AQP1、AQP2的水平:Elisa法检测,与模型组比较,龟甲胶高剂量组及六味地黄丸组的大鼠血清AQP2含量及AVP含量明显降低(P<0.01),AQP1含量也减少(P<0.05)。免疫组化检测,与模型组相比,龟甲胶干预后,龟甲胶剂量组大鼠肾组织AQP1、AQP2的表达均有降低。荧光定量PCR法检测,与模型组比较,龟甲胶干预后,龟甲胶剂量组大鼠肾组织AQP1m RNA、AQP2m RNA的表达均有下调。4、大鼠肾组织HE染色结果:与正常组相比,模型组肾组织肾小球充血,肾小球囊腔扩大,肾小管呈代谢性扩张,脂肪组织浸润。与模型组相比,龟甲胶低剂量组肾小球充血稍减轻,囊腔稍扩大,肾小管呈代谢性扩大,可见少量脂肪组织浸润,龟甲胶中、高剂量组及六味地黄丸组肾小球轻度充血,囊腔无明显扩大,肾小管无明显扩张。结论:给大鼠灌胃甲状腺素片可以成功制备肾阴虚病理模型,龟甲胶能纠正肾阴虚大鼠的基本体征改变及体内环核苷酸含量及AQP1、AQP2的表达,高剂量的龟甲胶效果最佳。