去氢骆驼蓬碱（Harmine）主要来源于植物骆驼蓬根部,属于β-咔啉生物碱类化合物。去氢骆驼蓬碱具有显著的药理活性,包括抗肿瘤活性、抗抑郁症活性、抗菌活性以及杀虫活性等,但作用谱较窄。Sf9细胞是草地贪夜蛾卵巢细胞,是理想的昆虫细胞毒理研究材料。本文在利用分子对接技术模拟研究去氢骆驼蓬碱对DNA拓扑异构酶I作用机制的基础上,定向结构改造合成衍生物ZC-14并测定对Sf9的细胞活性,进一步研究明确了增殖抑制机制,证实衍生物ZC-14具有诱导Sf9细胞发生凋亡作用,明确线粒体参与ZC-14诱导的Sf9细胞凋亡。主要研究结果如下:1.利用计算机模拟技术对去氢骆驼蓬碱与DNA拓扑异构酶I进行分子对接,结果表明二者具有一定的相互作用关系;通过骨架生长设计合成衍生物ZC-14,对接结果显示ZC-14与拓扑异构酶I的相互作用强于去氢骆驼蓬碱。2.酶活性测定结果表明去氢骆驼蓬碱和衍生物ZC-14均对拓扑异构酶I具有抑制作用,其中ZC-14抑制效果强于去氢骆驼蓬碱。3.MTT法检测去氢骆驼蓬碱及ZC-14的Sf9细胞毒性,结果表明衍生物ZC-14处理细胞24和48 h的IC₅₀分别为17.33μg/mL和8.54μg/mL;而去氢骆驼蓬碱的IC₅₀值分别为59.32μg/mL和50.59μg/mL。4.细胞增殖抑制机制研究表明ZC-14通过诱导Sf9细胞发生凋亡的方式抑制细胞增殖,主要表现为7.5μg/mL ZC-14处理Sf9细胞后形态学观察出现凋亡小体,Hoechst染色细胞出现核浓缩,琼脂糖凝胶电泳检测细胞DNA出现梯状条带,PI单染测细胞周期表明细胞阻滞于G₂/M期。FITC/PI双染检测凋亡率表明细胞出现不同比例的细胞凋亡率,其中处理24 h细胞凋亡率32.1%;Caspase酶活检测表明Caspase-3酶活性显著上调;qRT-PCR证实Caspase-1 mRNA水平表达量显著上升;Western Blot检测结果表明Cleaved-Caspase-3蛋白表达量显著上调。5.线粒体参与ZC-14诱导的Sf9细胞凋亡,主要表现为罗丹明123染色细胞绿色荧光随处理时间延长而减弱,线粒体膜电位下降。Western Blot证实ZC-14处理后细胞色素C从线粒体释放到胞质。本文具体讨论ZC-14细胞凋亡诱导活性及作用靶标,提出今后应深入研究的内容。本论文研究结果为开发以去氢骆驼蓬碱为先导化合物的新型农药提供重要参考。