目的:本研究主要通过对异叶青兰总黄酮体外抗氧化活性的考察,以及异叶青兰总黄酮（DHBF）对LPS及H₂O₂诱导的H9c2心肌细胞的影响及作用机制研究,以期为该药材的开发利用提供参考依据。方法:1.采用70%乙醇回流提取,AB-8大孔吸附树脂纯化制备DHBF,通过硝酸铝比色法测定DHBF含量,并建立方法学考察。2.以维生素C作为阳性对照,通过考察DHBF对DPPH自由基、ABTS自由基的清除能力,以及总抗氧化能力（T-AOC）,评价其体外抗氧化活性。3.以10μg/m L的脂多糖（LPS）诱导H9c2细胞建立炎症模型,以300μM过氧化氢（H₂O₂）诱导H9c2细胞,建立H9c2细胞损伤模型。4.采用细胞增殖-毒性检测法（CCK-8）检测不同浓度DHBF对H9c2心肌细胞活性的影响,以及DHBF对H₂O₂诱导H9c2细胞存活率的影响。5.利用ELISA法检测IL-6、IL-1β、IL-10以及TNF-α等炎症因子的分泌。6.采用细胞凋亡-Hoechst染色试剂盒检测细胞凋亡情况。7.采用激光共聚焦显微镜检测细胞线粒体膜电位（JC-1）。8.采用Western blot法检测TLR4,My D88,NF-κB,Bax、Caspase-3的蛋白表达水平。结果:1.DHBF平均含量为48.6%,其对DPPH和ABTS自由基清除率可高达82.94%和98.47%,IC50值分别为0.063 mg/m L和0.079 mg/m L。总抗氧化能力（T-AOC）达5.81μmol/m L。2.CCK-8结果表明,当浓度≦50μg/m L时,其对H9c2细胞的活性无抑制现象。与正常组相比,H₂O₂模型组H9c2细胞存活率显著下降（P<0.05）,不同浓度的DHBF均可以提高H₂O₂诱导的H9c2细胞存活率,其中25、50μg/m L的DHBF可以显著提高H₂O₂诱导的H9c2细胞存活率（P<0.05）。3.与正常对照组相比,LPS模型组细胞上清液中IL-6、IL-1β及TNF-α表达显著提高（P<0.01）,IL-10的表达显著降低（P<0.01）。给予不同浓度DHBF的H9c2细胞组,均能够降低IL-6、IL-1β以及TNF-α的表达。其中25、50μg/m L的DHBF能够显著降低IL-6、IL-1β以及TNF-α的表达（P<0.05,P<0.01）。给予50μg/m L的DHBF的H9c2细胞组,能够提高IL-10的表达（P<0.05）。4.与正常组相比较,模型组TLR4蛋白表达水平显著提高（P<0.05）,My D88以及NF-κB的蛋白表达水平也显著升高（P<0.01）。给予不同浓度DHBF的H9c2细胞组,均能够降低TLR4蛋白的表达（P<0.05,P<0.01）。给予不同浓度DHBF的H9c2细胞组,均能够降低My D88蛋白的表达,其中25、50μg/m L的DHBF能够显著降低My D88蛋白的表达水平（P<0.05）。给予不同浓度DHBF的H9c2细胞组,均能够降低NF-κB蛋白的表达（P<0.01）。5.与正常对照组相比较,H₂O₂模型组细胞形态损伤明显,线粒体膜电位下降,不同浓度DHBF能够改善细胞损伤,使线粒体膜电位上升。6.与正常对照组相比较,模型组Caspase-3及Bax的蛋白表达显著升高（P<0.05,P<0.01）,50μg/m L的DHBF能够显著降低Caspase-3及Bax的蛋白表达（P<0.05）。结论:1.DHBF具有良好的体外抗氧化活性。2.DHBF可以有效抑制LPS诱导的H9c2细胞相关炎症因子与蛋白的表达,其机制可能与抑制TLR4/My D88/NF-κB信号通路有关。3.DHBF能够抑制H₂O₂诱导的H9c2细胞凋亡。提示DHBF可以通过抑制炎症反应以及氧化应激反应保护心肌细胞。