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随着经济条件改善、生活方式改变和人口老龄化，在中国，糖尿病（DM）的发病率呈明显增高趋势。97年我国公布的糖尿病患病率2.51％预测到2010年，中国糖尿病的患病率将达14％。流行病学资料提示糖尿病是发生动脉粥样硬化的重要危险因素。糖尿病患者合并冠心病、脑血管及周围血管病的机率大大高于非糖尿病者。糖尿病的心血管疾病不仅发病率高，而且发生早、病变范围广、且更严重，是糖尿病病人致死、致残的主要原因。 糖尿病动脉粥样硬化的病因是多因素参与的，且尚未完全明了。已有资料显示，在正常动脉壁中，巨噬细胞少，且巨噬细胞脂蛋白脂酶（LPL）活性低；进展期粥样斑块中含大量巨噬细胞样细胞，LPL活性明显增高。血管壁中巨噬细胞产生脂蛋白脂酶，使脂质积聚于动脉壁内，促进动脉粥样硬化进展。 过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARs）属核受体超家属成员，浙江大学博土生学位论文包括 PPAR a、PPAR 6。PPAR Y 3种亚型。PPARs结合到基因（如 LPL等）启动于上的特殊的过氧化物酶体增殖物反应元件（PPREpo，oxlsome prollferator responsive element）后，调节靶基因表达。由于 PPAR Y与脂肪细胞分化、肥胖及胰岛素抵抗有关，毗格列酮等嚏哇烷二酮类抗糖尿病药为其靶分子，故越来越引起人们注意。 尽管糖尿病动脉粥样硬化具很高的发生率，而巨噬细胞脂蛋白脂酶在促进动脉粥样硬化过程中起重要的作用。有关2型糖尿病患者巨噬细胞LPL的表达及其调节的相关研究较少。此外，肿瘤坏死因子－a在2型糖尿病动脉粥样硬化中也起较重要作用。本文主要研究2型糖尿病患者巨噬细胞 LPL及 P叩R Y的表达，及毗格列酮对巨噬细胞LPL、PPAR v的表达的影响；并对肿瘤坏死因子－口进行毗格列酮治疗前后的动态观察。 研究对象包括47例2型糖尿病患者，和与之性别、年龄、体重指数相匹配的28例对照者。所有糖尿病患者来自我院门诊，其中36例用磺腺类＋双肌类药治疗，而另门例则合用磺腺类＋双肌类药叩 格列酮。 参考报道的方法分离单核细胞，新分离的单核细胞经采用an t i｛D单抗的FCM流式细胞技术及免疫组织化学法证实。在含20％h八）的自身血清的RPMll640培养液中，刺激单核细胞分化为巨噬细胞。培养4天后，用TRIZOL试剂提取巨噬细胞的总RNA，经逆转录反应合成CDNA。再分别采用三对合成的特异引物，LPL 4浙江大学博士生学位论文 （5’－GAGATTTCTCTGTATGGCACC－3’和 5’－CTGCAAATGAGACACTTTCTC－3’）、PPARr（5’－TCTCTCCGTAATGGAAGACC－3’和 5’－GCATTATGAGACATCCCCAC－3’）和p－actin（5’－TCGACAACGGCTCCGGCA－3’和5’－CGTACATGGCTGGGGTGT－3’），经扩增得CDNA片段LPL 277hp。PPAR。474hp、其中D｛ctin 370hp作内参照用。扩增产物在1．2％琼脂糖凝胶上电泳分离。目的片段用 pGEM－T and pGEM－T Ea。y Vecto，Systems经分子克隆后，直接测序证实。DNA电泳条带，用美国 Kodak digital－science纠stem DC叶0凝胶成像系统分析各条带。血清TNF－口用双抗体夹心EL SA法测定。 结果显示：与对照组mRNA水平LPL 0．74士0．19和 PPARr 0．76士0．20相比，糖尿病巨噬细胞LPLI．05士0．26明显增高，而PPARr061士0．23显著降低；合用毗格列酮治疗后，其LPLmRNA水平0．79士0．20明显降低，PPARr 0．65士0．29则有上升趋势但无统计学意义。2型糖尿病血清TNF－a（49．72 us／。1，P肋25．77；P，。123．05）显著高于对照组（16．88pg／ml，P。。15．34＊伤22．84），增高的血清TNF－口合用e格歹酮治疗后（17．4Sue／ml，P。。2．50；P，。31．81）则明显下降。 上述资料提示：2型糖尿病组患者与对照组相比，单核细胞来源的巨噬细胞LPL mRNA过度表达，而PPAR，mRNA表达则受抑制；2型糖尿病合用毗格列酮者与非合用者相比，增高的巨噬细胞 LPL mRNA水平明显降低，PPARr mRNA表达水平则有增高趋势；2型糖尿病血清TNF－Q水平较对照组明显升高，合用毗格列酮治疗后则较合用前显著下降＊格列酮等噬哇烷二酮类药在2型糖尿病动脉粥样硬化过程中 5浙江大学博士生学位论文可能起潜在的有益作用。