背景及目的:近年来肿瘤的发病率在逐年升高,随着医疗技术的不断发展,越来越多的肿瘤患者得以长期生存。但女性患者在肿瘤治疗过程中所采取的治疗方式,包括手术、放疗及化疗都对生殖内分泌系统造成了不可逆转的损伤,进一步引起的性腺器官功能丧失及不孕等问题也随之而来。这部分患者十分迫切的希望能在接受肿瘤治疗之前保存生育能力。卵巢组织冷冻是生育力保存的方法之一,适用于任何年龄阶段的女性,并且不会耽误肿瘤治疗的时机。卵巢组织冷冻方法主要有慢速程序化冷冻和玻璃化冷冻,目前通过这一生育力保存方法出生的新生儿中,绝大多数采用的是慢速程序化冷冻方法,但程序化冷冻需要昂贵的仪器设备,并且操作繁琐、耗时长。随着冷冻技术的不断提高,玻璃化冷冻成为一种新的冷冻方法,在临床上已广泛应用于卵子及胚胎的冷冻。玻璃化冷冻技术是采用较高浓度的冷冻保护剂减少组织及细胞内水分的含量,然后直接将组织投入液氮中,在非常快的冷冻速率下与冷冻保护剂混合的水分子无法排列成晶体结构,而是形成一种玻璃化的粘稠状态,减少细胞内外冰晶的形成,从而减少细胞的冷冻损伤。与慢速程序化冷冻相比,玻璃化冷冻更适合冷冻结构较复杂的组织。快速降温是玻璃化冷冻技术减少组织冷冻损伤的关键,载体的选择十分重要。本研究应用新型载体对羊卵巢组织进行玻璃化冷冻,并与慢速程序化冷冻效果进行比较,在解冻后进行组织的体外培养、组织学检测以及凋亡检测等,以探讨新型载体在羊卵巢组织玻璃化冷冻中的冻存效果。材料与方法:32个羊卵巢取自8-10月、体重约30Kg的16只未孕母羊。获取的羊卵巢随机分为4组:新鲜组织对照组(A组)、慢速程序化冷冻组(B组)、新型载体I玻璃化冷冻组(C组)及新型载体II玻璃化冷冻组(D组)。对各组卵巢组织进行体外培养,测定雌激素水平;HE染色,进行形态学分析;免疫组化及TUNEL(末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记)技术,观察细胞增殖及凋亡情况。结果:1、冷冻复苏后各组原始卵泡形态正常率低于新鲜组(P<0.01);程序化冷冻组初级卵泡形态正常率低于新鲜组(P=0.000);2个玻璃化冷冻组初级卵泡形态正常率与新鲜组无显著差异(P>0.05);冷冻复苏后各组原始卵泡及初级卵泡正常形态率无统计学差异(P>0.05)。2、激素水平各组之间统计学无差异(P>0.05);3、新鲜组PCNA 阳性表达率为17.2%,B、C、D组分别为15.6%、16.7%、16.4%,各组PCNA阳性率之间无统计学差异(P>0.05)。4、冷冻复苏各组细胞凋亡数目明显高于新鲜组(P<0.01),B组细胞凋亡数目明显高于C组和 D 组(P<0.01)。结论:1、程序化冷冻及采用新型载体的玻璃化冷冻均可较好的保存羊卵巢组织的结构,后者能更好的保存大块羊卵巢组织的细胞活性;2、程序化冷冻及玻璃化冷冻复苏后的羊卵巢组织仍具有良好的内分泌功能;3、PCNA阳性表达的卵泡比率较冷冻前无明显变化,说明冷冻复苏对羊卵巢组织的增殖活性没有明显影响;4、应用新型载体的玻璃化冷冻能较好的保存大块羊卵巢组织的结构及活性。研究背景:子宫畸形是一种常见的生殖道畸形,可分为纵隔子宫、单角子宫、双角子宫、双子宫、残角子宫等,其中纵隔子宫(uterus septum)是子宫畸形最常见的类型,约占35%,在普通人群中的发生率约为2.3%,在不孕及有流产史的女性中其发生率更高。纵隔子宫主要是由于苗勒氏管异常的发育、吸收及融合导致的。欧洲人类生殖与胚胎学会(ESHRE)与欧洲妇科内镜学会(ESGE)将子宫纵隔分为:不完全性纵隔子宫及完全性纵隔子宫。纵隔子宫可导致不良的妊娠结局,如流产、早产,同时可影响胎位,增加剖宫产率。其造成流产的原因可能与子宫纵隔内膜腺体数量稀少,增殖与子宫内膜不同步有关。近年来随着宫腔镜技术的不断发展,宫腔镜下子宫纵隔切除术(hysteroscopic resection of uterine septum,HRUS)已取代传统的开腹手术。HRUS术创伤小,手术时间短、恢复快,可改善患者的生殖预后,已成为治疗纵隔子宫的标准术式,但近年来关于HRUS术后患者妊娠结局的报道并不一致。目的:分析宫腔镜下子宫纵隔切除术后患者的术前及术后的妊娠结局,探讨纵隔子宫及HRUS术对妊娠结局的影响,以期为纵隔子宫的诊治提供临床数据支持。方法:统计2015年1月至2017年12月于山东大学齐鲁医院行宫腔镜下子宫纵隔切除术,且随访成功的193例患者。回顾性分析患者手术前后的妊娠率、活产率、早产率、剖宫产率、自然流产率及异位妊娠率。根据病史将患者分为不孕组、偶发性流产组、复发性流产组;根据纵隔类型将患者分为不完全子宫纵隔组及完全性子宫纵隔组;根据术后处理方式的不同分为对照组、球囊组、赛必妥组及球囊组+赛必妥组,分析以不同方法划分的各组之间上述指标的差异。应用IBM SPSS Statistics 24.0软件进行统计学分析,绘图采用GraphPad.Prism8.0.2软件。结果:1、手术并发症的发生率为3.1%,术后宫腔粘连发生率为1%,纵隔残留发生率为2.1%,二次手术率为2.1%;2、术后患者首次妊娠时间为2-32个月,平均9.79±7.058个月;3、术后患者的总体妊娠率为80.8%,活产率为80.1%,早产率12.7%,自然流产率17.3%(其中早期自然流产率13.3%),与术前相比均有所改善(P<0.05);4、手术前后患者的剖宫产率、异位妊娠率无明显差异(P>0.05);5、术前不完全性子宫纵隔组患者妊娠率高于完全性子宫纵隔组(P=0.022);6、术后不同类型纵隔患者之间的妊娠率、活产率及流产率等指标无明显差异(P>0.05);7、术后采用不同处理方式的各组之间,妊娠率无明显差异(P>0.05)。结论:1、HRUS术可明显提高患者的妊娠率、活产率,降低自然流产率,妊娠结局较术前明显改善;2、HRUS术后妊娠结局与纵隔类型无关;3、与不完全性子宫纵隔相比,完全性子宫纵隔更易引起不孕;4、HRUS术不影响患者的分娩方式;5、术后防粘连处理方式不影响妊娠率;6、HRUS术后,患者妊娠时间主要集中在术后1年。