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目的探讨miR-150通过NKT细胞和T细胞对小鼠糖尿病发生和发展的影响。方法利用miR-150基因敲除的小鼠(miR-150 knock-out,miR-150KO)和野生型正常对照C57BL/6J小鼠(Wild type,WT),采用链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)注射150mg/kg/只来制备糖尿病小鼠模型,然后观察miR-150KO和WT小鼠血糖和糖尿病发病率变化以及对不同免疫细胞的影响,α-半乳糖酰基鞘氨醇(α-galcer)6μg/只注射,观察对STZ诱导的WT和miR-150KO小鼠糖尿病发病率的影响以及NKT和T细胞细胞因子的变化。选择年龄(6-10周)匹配的雄性miR-150KO和WT小鼠各24只,注射前12h做饥饿处理,记录小鼠体重,每只小鼠体重约20g。MiR-150基因敲除小鼠和正常C57小鼠各分为四组每组miR-150KO和WT小鼠各6只:STZ单独组、STZ+α-galcer组、STZ+DMSO溶剂对照组以及柠檬酸缓冲液溶剂对照组。监测小鼠尾血标本的非空腹血糖,注射当天为第0天,记录小鼠血糖数值,然后每隔3天分别测量记录,连续2次血糖水平≥13.8 mmol(250 mg/dl)时诊断为糖尿病;然后进行下一步检测1 PCR鉴定小鼠基因型;2Real-time PCR鉴定miR-150基因敲除;3使用流式细胞术检测小鼠脾脏中T、B细胞、调节性T细胞和NKT细胞的数量变化以及T细胞和NKT细胞内产生的IL-4、IFN-γ、IL-17的变化;4采用ELISA检测小鼠血清胰岛脱羧酶自身抗体(GADA)以及胰岛细胞自身抗体(ICA)的变化;结果1 STZ注射2周后miR-150KO小鼠糖尿病成功率约为73.5%,WT野生小鼠糖尿病成功率约为33.3%,miR-150的缺失导致了miR-150 KO小鼠1型糖尿病(T1DM)发病率增加;2 STZ和α-galcer共同处理后miR-150KO小鼠糖尿病发病率降低,而WT鼠发病率无明显变化,α-galcer显著降低了STZ诱导miR-150 KO小鼠发生T1DM;3 STZ处理使miR-150KO小鼠NKT细胞升高,Treg细胞减少。4 STZ诱导后miR-150 KO小鼠总T细胞中IFN-γ和IL-17增加。5α-galcer减少miR-150 KO小鼠总T细胞中IL-17的表达。6 STZ诱导没有增加miR-150KO小鼠和C57BL/6J小鼠的ICA和GADA自身抗体水平。结论1 miR-150的缺失促进了T1DM的发生,部分原因是Treg的降低和IL-17在T细胞中的升高。miR-150通过NKT细胞和T细胞在糖尿病的发生发展机制中发挥着重要作用;2 miR-150缺失导致小鼠ICA和GADA自身抗体水平增高,但并不引起小鼠血糖升高,STZ处理只增加了WT小鼠的ICA和GADA水平,但对miR-150KO小鼠的ICA和GADA水平没有影响;3 NKT特异细胞激活剂α-galcer显著降低miR-150KO小鼠T1DM的发生,其原因与α-galcer降低IL-17在T细胞中的表达有关。图11幅;表7个;参121篇。