黄芪多糖抑制心肌成纤维细胞IL-1β表达改善脓毒症小鼠心脏功能

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背景  脓毒症是重症监护病房常见疾病,脓毒症患者合并心脏功能不全时其死亡率极高。脓毒症心脏功能不全的发病机制还不明确,因而缺乏有效的治疗手段。黄芪在中草药中是补气的重要中药之一,黄芪的主要活性成分之一是黄芪多糖,它是一种常见中药。黄芪多糖的主要成分有甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖、木糖和L-阿拉伯糖等。黄芪多糖具有调节免疫、抗氧化、抗糖尿病、抗炎症、神经保护等多种生物活性。  目的  探讨黄芪多糖对脓毒症条件下小鼠心肌成纤维细胞IL-1β蛋白表达水平以及评价黄芪多糖对脓毒症小鼠心脏功能的影响。  方法  1.动物研究:取 2-3 月龄 C57BL/6 小鼠,通过腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharidi,LPS)建立脓毒症模型,设立对照组、脓毒症组和脓毒症加黄芪多糖(astragalus polysaccharides,APS)处理组。6小时后酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠外周血IL-1β蛋白表达,24小时后超声心动图检测小鼠心脏功能。  2.细胞研究:分离和培养小鼠心肌成纤维细胞,成纤维细胞用LPS刺激以体外模拟脓毒症条件。实验设立对照组,LPS处理组,LPS+黄芪多糖低、中、高浓度(1、10、100mg/l)处理组。采用酶联免疫吸附法检测细胞上清液中IL-1β,采用免疫印迹法检测Pro-IL-1β及IL-1β蛋白。  结果  1.脓毒症组小鼠外周血IL-1β水平较对照组明显升高(P<0.05),黄芪多糖处理组的脓毒症小鼠IL-1β则较生理盐水处理的脓毒症小鼠明显降低(P<0.05),其中APS200mg/kg及APS400mg/kg(P<0.01)。脓毒症小鼠心脏功能较对照组小鼠心脏功能明显减退(P<0.05),黄芪多糖处理的脓毒症小鼠较未处理的脓毒症小鼠心脏功能明显改善(P<0.05)。  2.LPS刺激的心肌成纤维细胞与对照组细胞比较,LPS组(LPS1ng/ml)诱导心肌成纤维细胞Pro-IL-1β改变及释放的IL-1β蛋白明显增加(P<0.05),而黄芪多糖处理组的心肌成纤维细胞LPS刺激后,Pro-IL-1β及IL-1β水平较LPS刺激但无黄芪多糖处理细胞明显减少(P<0.05)。  结论  脓毒症导致小鼠IL-1β水平增高导致小鼠心功能下降,黄芪多糖抑制心肌成纤维细胞Pro-IL-1β的合成及释放而改善脓毒症小鼠心脏功能。
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学位
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