目的：本研究以双向电泳(2-DE)与基质辅助激光解吸附电离串联飞行时间质谱测量(MALDI-TOF-TOF)为工具，以受雌激素充分影响的人脐血来源的成骨细胞为模型，结合生物信息学分析技术，探索雌激素影响下的成骨细胞蛋白质的差异表达，寻找成骨细胞中雌激素作用通路的功能蛋白以及与之作用相关的因子。　　 方法：无菌条件下取正常足月产脐带血，采用肝素抗凝。密度梯度离心法分离其中的单核细胞，再采用贴壁筛选培养法纯化培养人脐血间充质干细胞(MSCs)。经纯化培养后，采用定向成骨细胞分化诱导培养体系，并分为两组，实验组加入10-8M17β-雌二醇干预，并设立空白对照组。于诱导分化14天后，对实验组和对照组取样进行von kossa法成骨鉴定，然后分别提取实验组和对照组细胞的总蛋白，进行双向电泳分析，确定蛋白差异点，经酶切后通过MALDI-TOF/TOF串联质谱鉴定差异蛋白表达。　　 结果：1)自脐血中纯化培养获得的间充质干细胞，细胞形态均一，为典型的纺锤状；2)细胞在特定诱导条件下可向成骨分化，培养14天后von kossa染色可见黑色矿化结节沉积；3)运用双向电泳实验技术，观察到处理组与对照组细胞凝胶图像存在多个蛋白差异点，选择其中差异最显著的20个蛋白点，经过质谱分析，鉴定出8种差异蛋白分子表达，分别是半乳糖结合蛋白-1(LEG1)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、肌动蛋白相关蛋白-3(ARP3)、纽蛋白(VINC)、巨噬细胞帽蛋白(CAPG)、色氨酰-tRNA合成酶(TrpRS)、乙醛脱氢酶2(ALDH2)、谷胱甘肽S-转移酶O-1(GSTO1)。　　 结论：1)采用密度梯度离心与贴壁筛选培养相结合的方法，能够成功地从脐血中获得并纯化培养MSCs；2)脐血来源的MSCs具有成骨分化潜能，在成骨诱导体系下，可以定向分化为成骨细胞；3)利用双向电泳和质谱测量技术成功分离并鉴定了雌激素干预的实验组与对照组的脐血来源成骨细胞的蛋白质，为进一步寻找有功能的差异蛋白提供了物质基础。