在我国,肿瘤是造成居民死亡的主要疾病,肾癌是其中之一,肾癌也是泌尿系统中常见的肿瘤,目前关于肾癌的治疗方式依然是通过早期诊断,进行切除手术,但是有很多肾癌患者在发现时已经进入中晚期,且有部分患者发生肿瘤细胞转移,因此为了提高肾癌的诊断率,增强肾癌的治疗效果,需要对肾癌进行研究,发现更有效的肾癌诊断和治疗方法。苹果酸酶(malic enzyme,ME)是一种代谢酶,它能催化苹果酸转化成丙酮酸,产生NADPH或者NADH。在哺乳动物细胞中苹果酸酶主要有三种亚型,根据其在细胞内的定位不同分别命名为为苹果酸酶1(malic enzyme1,ME1)、苹果酸酶2(malic enzyme2,ME3)、苹果酸酶3(malic enzyme3,ME3)。本论文主要针对ME1在肾癌中的作用和产生作用的机制做出以下研究内容。主要利用肾癌细胞系RC1和RC2,通过病毒包装,感染肾癌细胞系,促使ME1在肾癌细胞系RC1和RC2中过表达,并且筛选过表达稳定克隆细胞系;利用MTT实验和裸鼠皮下成瘤实验检测ME1对肾癌细胞增殖的影响;利用细胞划痕实验和transwell实验检测ME1对肾癌细胞迁移的影响;利用流式细胞仪检测ME1对肾癌细胞的周期的影响;检测肾癌细胞对葡萄糖的消耗和细胞内乳酸和ATP的含量,研究ME1对代谢影响。实验结果发现,过表达ME1能够抑制肾癌细胞的代谢、增殖、转移,同时也能够引起细胞的周期阻滞,使细胞停滞于G1期。在ME1过表达稳定的肾癌细胞系中检测细胞迁移和侵袭的相关蛋白表达水平和mRNA的转录水平,同时利用western blot检测周期相关蛋白表达情况。实验结果发现,过表达ME1后,RC1细胞的vimetin蛋白表达下降,E-cadherin蛋白表达增加;p21和p27的表达也有增加。而关于细胞迁移和侵袭的相关基因在mRNA水平的检测,结果发现E-cadherin、vimetin、ZEB1、Twsit、snail和p62在mRNA水平没有较大差异。肾癌中ME1能够抑制转录因子NF-?b的活性,可进一步探究ME1在调控细胞转录因子NF-?b下游基因表达情况。细胞周期是肿瘤检测的功能指标,研究ME1引起周期阻滞的具体机制是下一步工作的重点。