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研究发现,哺乳动物Myoz1基因可以同时调控骨骼肌纤维类型和直径,而骨骼肌纤维类型和直径是决定动物肉品质和产量的关键因素,因此Myoz1基因具有较高的研究价值,但目前尚缺乏关于禽类Myoz1基因的研究报道。本试验首先通过直接测序的方法检测Myoz1基因外显子在艾维茵鸡和矮脚黄鸡中的多态信息,并通过与两个品种鸡屠宰性状的关联分析,探究Myoz1基因在鸡和哺乳动物中的功能的一致性;然后,采用个体组织定量、基因干扰和过表达相结合的方法,进一步探究Myoz1基因在鸡骨骼肌早期发育中的作用。主要结果如下:(1)Myoz1基因外显子区存在5个单核苷酸多态位点(SNP),且5个SNP位点在艾维茵和矮脚黄鸡中都存在,其中包括3个错义突变(SNP1:g.16022512G>T,Aal103 Ser;SNP3:g.16022560C>T,His 119 Tyr和SNP5:g.16023903 A>G,Ser 189 Gly),2个同义突变(SNP2:g.16022529T>C和SNP4:g.16023878A>C)。SNP与性状相关分析结果表明,矮脚黄中的SNP2、SNP3、SNP5和艾维茵中SNP3、SNP4、SNP5都与性状间存在显著相关性(P<0.05),且这些与Myoz1基因外显子区域SNP显著相关的性状主要为肌肉及骨骼性状。(2)定量检测胚胎期第10天(E10)至出壳第7天(D7)时间段内胸肌和腿肌中Myoz1基因的表达情况,发现从E14开始,胸肌和腿肌中都可以明显检测到Myoz1基因的表达。在胸肌中,以E19和D3两个时间点为转折点,Myoz1基因的表达量呈先升高再降低再升高的表达变化趋势;而在腿肌中,Myoz1基因的表达量随着时间变化一直持续升高;此外,对相同时间点胸肌和腿肌中Myoz1基因的表达量进行比较,发现胚胎期第18天(E18)、E19时间点,Myoz1基因在胸肌中的表达量显著高于腿肌(P<0.05),而在D3时间点Myoz1基因在腿肌中的表达量显著高于胸肌(P<0.05),其余时间点,Myoz1基因在胸肌和腿肌中的表达量无显著差异(P>0.05)。(3)定量检测鸡胚胎发育及胚后发育早期胸肌MuRF1、Atrogin-1的表达,追踪该时期鸡胸肌肌肉萎缩发生情况,发现胸肌中MuRF1和Atrogin-1基因的表达量分别在E19至E20和E20至D1时间内显著高于前后时间点MuRF1和Atrogin-1基因的表达量(P<0.05),综合胸肌中两个基因的定量结果,胸肌肌肉萎缩发生在E20前后。以不发生肌肉萎缩的腿肌中MuRF1、Atrogin-1的表达量作为参照,进一步确定胸肌肌肉萎缩发生情况,发现在E17-D2时间内胸肌MuRF1的表达量都显著高于腿肌(P<0.05),且在E19、E20差异达极显著水平(P<0.01);而胸肌和腿肌中Atrogin-1的表达量虽然在胚胎期E20及D1显著高于其他时间点的表达量(P<0.05),但这两个时间点Atrogin-1基因在胸肌和腿肌中的表达水平无显著差异(P>0.05),表明MuRF1基因比Atrogin-1基因更适合作为鸡胚发育时期胸肌肌肉萎缩标的标记基因。而以MuRF1基因为标记的胸肌肌肉萎缩发生在E17-D2时期,且在E19-E20时间内,肌肉萎缩发生最剧烈。(4)在骨骼肌卫星细胞中分别进行Myoz1和MuRF1基因的干扰、过表达试验,发现干扰MuRF1基因使细胞中的Myoz1基因表达量显著降低(P<0.05),过表达MuRF1基因使细胞中的Myoz1基因表达量显著升高(P<0.05),而干扰或过表达Myoz1基因对细胞中MuRF1基因的表达皆无显著影响,因此Myoz1基因与MuRF1基因之间存表达调控关系,且为MuRF1基因调控Myoz1基因的表达。本研究通过基因多态性与性状关联分析,发现鸡Myoz1基因主要影响肌肉相关性状;同时,结合组织及细胞试验结果发现,Myoz1基因的表达受肌肉萎缩关键基因MuRF1的调控,因而胚胎发育时期胸肌发生萎缩时,是MuRF1基因表达的变化导致了同时期胸肌和腿肌中Myoz1基因的差异表达。因此,具有调控肌纤维直径功能的Myoz1基因可能参与调控胚胎发育时期胸肌肌肉萎缩。