目的:通过观察三七对脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)急性期神经血管单元(neurovascular unit,NVU)的影响,探讨三七(Panax Notoginseng,PN)对缺血性脑损伤的干预作用。方法:(1)SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、动物模型组(CIRI)、三七组(PN,50 mg/kg、100 mg/kg、150 mg/kg剂量组);除Sham组外,其余组制作(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠模型,缺血2 h、再灌注7d;PN组于CIRI过程分别给予不同剂量的三七溶液灌胃;Sham组、CIRI组同时间均予等量的生理盐水灌胃;Zea longa法对各组大鼠进行神经功能评分,TTC染色测定脑梗死体积百分比,并利用透射电镜(transmission electron microscopy,TEM)技术观察NVU超微结构变化。(2)体外分离培养3种细胞(神经元、星形胶质细胞、微血管内皮细胞),对培养的细胞进行形态观察及免疫荧光鉴定;利用Transwell小池构建三细胞共培养体系模拟NVU模型,并随机分为对照组(Control)、细胞模型组(OGD/R)、三七含药血清组(PN drug serum,PNDS);根据不同剂量的PN组将PNDS组同样分为相应血清药物浓度的三个剂量组;OGD/R组、PNDS组建立氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)模型;Control组不作OGD处理;经过OGD 2h后,OGD/R组、Control组更换含10%空白血清的DMEM含糖培养基,而PNDS组同一时间分别更换含10%不同浓度三七含药血清的DMEM含糖培养基;复氧24h;利用倒置显微镜观察细胞的生长状态,4h渗漏实验测定屏障的通透性,流式细胞技术检测细胞的凋亡率。结果:(1)1)动物实验中,与Sham组相比,CIRI组大鼠神经功能评分和脑梗死体积百分比均显著增加(P<0.01),电镜下缺血周边脑组织结构损伤严重;2)与CIRI组相比,PN组大鼠神经行为学评分和脑梗死体积百分比显著降低(P<0.01),细胞结构损伤有所减轻。(2)成功培养出高纯度的三种原代细胞,并构建了体外NVU共培养模型;1)Control组中神经元胞体圆润,折光性强,轴突粗长、相互交织;脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞生长紧密;Transwell池内液面4h后均无明显改变;2)与Control组相比,OGD/R组中神经元变形,折光性差,细胞连接疏松;脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞胞体收缩,有脱落现象;OGD/R组神经元和微血管内皮细胞的凋亡率显著增加(P<0.01),Transwell内液面4h后明显降低(P<0.01);3)与OGD/R组相比,PNDS组细胞状态明显改善,显著降低了神经元和微血管内皮细胞的凋亡率和4h渗漏(P<0.01)。(3)大鼠脑梗死体积在三七作用下呈剂量依赖关系的降低,而神经学评分、渗漏试验和细胞凋亡在PN剂量递增至100 mg/kg时药效趋于平稳。结论:(1)三七能够明显改善脑缺血后大鼠神经功能评分,减轻大鼠脑梗死体积和细胞损伤;(2)三七通过抑制神经元、微血管内皮细胞凋亡,降低共培养屏障的通透性,对神经血管单元具有整体保护作用;(3)100 mg/kg可能是CIRI大鼠较佳的药物剂量。