【摘 要】
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褪黑素(N- 乙酰-4- 甲氧基色胺,melatonin,简称MT).最近很多学者提供的体外研究资料表明,MT有作为自由基清除剂和总的抗氧化剂的作用.应用EPR技术证实其清除羟自由基的作用远
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褪黑素(N- 乙酰-4- 甲氧基色胺,melatonin,简称MT).最近很多学者提供的体外研究资料表明,MT有作为自由基清除剂和总的抗氧化剂的作用.应用EPR技术证实其清除羟自由基的作用远远超过谷胱甘肽,黄酮和一些吲哚结构类似物如serotonin,trytophan.它清除过氧自由基剂的作用超过维生素C和GSH,这些有名的自由基清除剂.目前对MT的兴趣可通过数量不断增长的许多直接或间接与其有关论文见证,在过去十年平均每年的有关MT和作用于肌受体周围的新的化合物的论文都成倍增长.在某种意义上说,称MT为黑暗激素,主要是由于在某一时间的特定浓度分布似乎更合适.然而缺少一种简便、灵敏、可靠的方法来检测MT是阐明其生理和病理作用的一个最大障碍[2-4]. 在最初尝试用生物检测法、气相色谱-质谱来检测MT在体液中的量,后来通过高效液相色谱[6-8],这些技术主要的限制是过于昂贵检测样品少.检测前样品处理复杂[3,4] .为了更进一步地研究松果体的功能,也为更深入了解药物受体的内在反应,为建立更完善的MT受体模型和设计新的可选性配体,为MT和其类似物治疗应用提供坚实的基础,我们制备和鉴定了抗MT的单克隆抗体.通过将MT用甲醛作连结剂连结到牛血清白蛋白上(BSA),采用皮下多点注射免疫小鼠得到了高效价,高亲和力,较好特异性的抗MT单克隆抗体,最后获得了5株单克隆细胞株,都能分泌针对MT的特异性抗体,建立了选择性基团免疫分析法,用制备的抗体测定了人血清中MT的含量,作了MT的抑制标准曲线,其抑制范围从50pg—30ng ,半抑制量为1.4ng.通过对多种类似物的交叉反应证实了抗体的特异性,单抗与MT反应,但几乎不与除6-Hydroxymelatonin以外的其它类似物反应,与6-Hydroxymelatonin反应系数为1.25﹪.
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