目的:艾维替尼是我国第一个自主研发的第三代EGFR抑制剂,主要用于治疗第一代EGFR靶向药物使用后耐药的非小细胞性肺癌。（1）本实验通过建立UPLC-MS/MS法检测大鼠血浆中艾维替尼浓度,对方法学的考察、条件优化等方式,探究艾维替尼在大鼠体内药代动力学研究及其生物利用度。（2）通过建立UPLC-MS/MS方法,同时检测CYP450各酶系探针药（右美沙芬、盐酸安非他酮、非那西汀、氯唑沙宗、甲苯磺丁脲和咪达唑仑）及其代谢产物的方法,探究艾维替尼对大鼠CYP450酶在体内、体外代谢活性的影响。方法:（1）采用ACQUITY UPLC BEH C18（50 mm×2.1 mm,1.μm）色谱柱,流动相为乙腈-0.1%甲酸水进行梯度洗脱,使用多离子反应监测（MRM）模式扫描的UPLC-MS/MS方法测定血浆中艾维替尼及内标地西泮的浓度。（2）随机选取健康雄性SD大鼠12只,分为两组,每组6只,同时给予艾维替尼,口服组灌胃剂量为10 mg/kg;静脉给药剂量为1 mg/kg。在用药后0.083、0.25、0.5、1、1.5、2、3、4、6、8、12和24 h尾静脉采集血浆样本。建立UPLC-MS/MS法检测大鼠血浆中艾维替尼血药浓度,同时建立方法学体系并进行条件优化,运用DAS 3.0软件进行药动学分析及SPSS 17.0进行统计学分析,同时得到艾维替尼在大鼠体内的生物利用度,以便对临床安全合理用药提供依据。（3）鼠肝微粒体体外孵育体系的建立:以上述6种探针药物为底物,以艾维替尼为抑制剂。在经过条件优化后,选择200μL的孵育体系,其中大鼠肝微粒体5-10μL,2μL探针底物混合液以及100 mM磷酸钾缓冲液（PH=7.4）,再将艾维替尼1¹00μM的浓度梯度溶液加入体系中,将其置于37℃水浴锅中摇晃,孵育时间5min,随后加入NADPH（1 mM）开始反应,30 min后取出置于冰浴中,加入冰冷的乙腈,以此来沉淀蛋白。充分涡旋后离心10 min,13000 rpm,取上清液2μL注射,用UPLC-MS/MS检测药物代谢情况,并分别计算IC₅₀值。以考察艾维替尼的在体外的代谢情况。（4）将12只健康雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组,各6只。实验组口服艾维替尼10 mg/kg,连续用药1周;对照组口服CMC-Na（羧甲基纤维素钠）,连续用药1周。两组大鼠在实验前一天禁食（12 h）,同时,当天给予10 mg/kg混合剂量的6种探针药,在灌胃后0.083、0.25、0.5、1、1.5、2、3、4、6、8、12和24 h取血样,置于1.5 mL离心管中,离心速度4000 rpm。离心10 min后,将血浆置于-80℃保存。建立方法学并进行条件优化,同时建立UPLC-MS/MS法检测大鼠血浆中探针药物及其代谢产物的血药浓度,通过分析血浆中药动学参数,来考察艾维替尼与探针药物在大鼠体内的相互作用。结果:（1）血浆中的艾维替尼在一定浓度范围内,具有良好的线性关系。经过方法学考察,日间和日内精密度（RSD）分别在8.28%和6.29%的范围内活动;日间准确度和日内准确度（RE）均在96.32%和97.24%范围内;提取回收率在85.71%-89.26%之间,显示样品在该方法下具有较好的提取回收率;基质效应在92.149%-104.24%之间,说明样品的检测不受基质所影响;混合样品在以下四种条件:室温6 h,4℃环境下存放24 h,-80℃2周,以及反复冻融3次后仍具有良好的稳定性。经过分析药动学参数,计算出生物利用度为30.81%。（2）通过体外代谢实验,确定了六种探针底物的浓度:非那西丁40μM,安非他酮20μM,右美沙芬10μM,甲苯磺丁脲100μM,氯唑沙宗20μM及咪达唑仑5μM。在1-100μM浓度范围内,药物艾维替尼对6种探针药物表现出不同程度的抑制作用。其IC₅₀值分别为:安非他酮6.39μM,非那西丁15.79μM,氯唑沙宗23.15μM,甲苯磺丁脲42.18μM,咪达唑仑27.64μM,右美沙芬44.39μM。（3）通过大鼠体内实验,发现艾维替尼对探针药物具有诱导作用。把实验组和对照组进行比较分析,非那西丁实验组的AUC_（0-t）比对照组减少了76.7%,清除率CLz/F则是对照组的4.3倍;安非他酮实验组的AUC_（0-t）比对照组减少了88%,t_1/2比对照组减少了52%,CLz/F则比对照组增加了87.1%;右美沙芬实验组的AUC_（0-t）比对照组减少了86.7%,CLz/F比对照组增加了87.5%;实验组甲苯磺丁脲的AUC_（0-t）比对照组减少了35.5%;氯唑沙宗实验组AUC_（0-t）比对照组减少41.7%,t_1/2比对照组减少了25.8%;咪达唑仑实验组AUC_（0-t）比对照组减少了79.3%,清除率CLz/F比对照组增加了64%。关于T_max,除了甲苯磺丁脲是5 h左右,其他5种探针药时间都在0.5 h以下,尤其是安非他酮和咪达唑仑在0.29 h。甲苯磺丁脲和右美沙芬实验组的t_1/2分别是8.96 h和5.04 h,其他探针药的t_1/2都在0.89-3.05 h之间。综上而言,艾维替尼对6种探针药均有不同程度的诱导作用,体内结果与体外结果相反。结论:（1）本文建立了灵敏、可靠的可检测大鼠血浆中艾维替尼药物浓度的UPLC-MS/MS方法。通过对本研究结果分析得出:艾维替尼口服后生物利用度较低,临床用药时,注意给药方式以及及时进行用药监护。（2）通过体外孵育实验,我们认为艾维替尼在大鼠体外对探针药有不同程度的抑制作用,以安非他酮和非那西丁抑制作用最为严重,长期服用艾维替尼存在引起肝脏损伤的风险。同时,艾维替尼在大鼠体内具有诱导作用,当病人联合应用艾维替尼和经CYP450酶代谢的药物时,应注意调整给药剂量。