茯苓发酵生产条件优化及其多糖的提取分离与生物活性研究

被引量 : 7次 | 上传用户:hlxc8k
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:对茯苓的液体发酵进行研究,确定茯苓液体发酵的最适发酵培养基和最适培养条件;从发酵液中分离提取茯苓多糖,并对其中的胞外多糖进行纯化、结构分析和体外抗氧化活性研究。方法:(1)采用PDA培养基进行转管培养,对6株不同来源的茯苓菌株进行活化、复壮;(2)测定发酵液pH值、还原糖含量和菌体量,绘制茯苓液体发酵生长曲线;观察记录不同固体斜面培养基菌龄对发酵适应期和对数生长期时间的影响;(3)在单因素分析(温度、转速、接种量、装液量、碳源种类和氮源种类)的基础上进行L934正交分析,优化茯苓液体发酵的发酵培养基和培养条件;(4)采用水提醇沉的方法和苯酚-硫酸法测定多糖含量,从发酵液中分别提取胞外多糖和胞内多糖,并将胞外多糖依次通过sevag法去除蛋白、透析和DEAE-52柱纯化分级得单一组分,用HPLC法检测纯度;(5)通过液相色谱、气相色谱、红外光谱、紫外光谱等方法和化学分析法初步鉴定纯化组分的组成及部分理化性能;(6)通过芬顿(Fenton)反应、邻苯三酚自氧化法、H2O2诱导红细胞氧化溶血抗脂质过氧化等方法,测定茯苓多糖的体外抗氧化性。结果:(1)6株菌种皆生长良好,活化、复壮成功;其中ACCC50864成活率高、生长迅速,选定为下阶段试验的标准菌株。(2)绘制出茯苓液体发酵生长曲线,并确定25日龄为最适固体斜面培养基菌龄。(3)正交试验结果表明,茯苓发酵的最适培养条件为:温度26℃、转速140r/min、接种量10%、装液量100mL/250mL;碳源葡萄糖,浓度2.5%,氮源牛肉浸膏,浓度2%,KH2PO4/MgSO4为0.6%/0.3%,维生素B1 4mg/100mL。(4)茯苓胞外多糖经DEAE-52分离,得到一种均一组分LLPSⅠ,经HPLC鉴定为单一组分。(5)LLPSⅠ经IR图谱分析分析显示具有多糖的特征吸收峰,主链以β-型糖苷键连接为主;经红外和紫外综合分析表明LLPSⅠ中没有N、S元素存在,应为非氨基糖;经TLC和GC分析其单糖组成为葡萄糖(Glc)。(6)体外抗氧化实验表明,茯苓胞外多糖具有较好的抗氧化作用。在多糖浓度为3.5mg/mL时,其对羟自由基清除率达56.2%;对超氧阴离子自由基具有一定的清除作用;当多糖浓度为5mg/mL时,对H2O2诱导的小鼠红细胞氧化溶血的抑制率可达43%;当浓度为5mg/mL时对脂质过氧化作用抑制率达到68.2%。结论:确定了茯苓发酵的最适发酵培养基和最适培养条件;对纯化组分LLPSⅠ进行结构测定,并确定其有一定的体外抗氧化功能。
其他文献
查理一世,曾经在我们的课本中出现过,平常的生活中也许很少提及这位国王。不过,生活在我们身边的小宠中有一种也是唯一一种倒是以这位国王的名字命名的,它就是翘鼻子的骑士查
期刊
本文采用傅里叶变换红外光谱手段,考察了正己烷等单溶剂体系和四氯化碳/正己烷、氯仿/正己烷、乙醇/正己烷等二元溶剂体系中丙酸、2-氯丙酸及其乙酯的羰基红外吸收峰的位置和
气体辅助注塑成型(Gas-assisted injection molding,简称GAIM)技术是利用高压惰性气体在注塑件内部产生中空截面,并推动熔体完成充填过程,实现气体均匀保压,一次成型壁厚不均
目的研究责任制整体护理干预对老年性白内障患者住院期间不良事件发生风险的影响效果。方法选取我院2015年1月-2018年1月收治的老年白内障患者80例作为研究对象,采用随机数字
本篇论文重点研究远程教育中教学媒体的交互性,研究的目的是建立一套从教学交互的角度分析媒体交互特性的方法。根据媒体在教学中的不同作用,作者将远程教育中的媒体的交互性
目的探讨优质护理模式在老年白内障围手术期的应用效果。方法选取本院在2013年1~8月收治的1200例老年白内障患者作为研究对象,所有患者均行超声乳化人工晶状体植入术,在围术
本论文从短距离无线通信应用的背景出发,首先简要介绍了短距离无线通信器件的产品和市场。然后分析了适合于短距离应用的发射机架构及其性能指标,重点介绍了直接调制锁相环分
语言、文化和翻译,关系十分密切。在桂林旅游文化的对外宣传中,是否能准确地将相关信息传播给外国游客朋友,将直接影响到桂林旅游业的拓展。以系统功能语言学的文化语境理论
目的应用实时荧光定量PCR(RQ-PCR)技术检测不同病程慢性粒细胞白血病(CML)bcr/abl mRNA水平;研究发生伊马替尼(IM)耐药的CML患者BCR/ABL融合基因ABL激酶区点突变的发生情况方
以美国顾客满意度指数ACSI模型为理论基础,结合电网企业IT呼叫中心特点,构建了包括呼叫中心形象、顾客期望、感知质量、感知价值、投诉处理5个结构变量组成的电网企业IT呼叫