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辅助性T细胞(Th细胞)在免疫系统中扮演重要角色,其主要功能是通过分泌细胞因子完成T细胞调控以及辅助其它淋巴细胞发挥作用。Th1、Th2是Th细胞的两大亚群。正常情况下,Th1/Th2保持平衡状态,维持正常免疫功能。当机体功能异常时,一般伴随着Th1/Th2平衡的失调,这种现象称为“Th1/Th2平衡漂移”。随着肿瘤免疫治疗的不断发展,恶性肿瘤与Th1/Th2平衡漂移的关系成为该领域的研究热点之一,而药用天然产物因其毒副作用小,对免疫功能有一定调节作用等优点,在肿瘤免疫研究中受到人们的青睐。黄腐酚是从啤酒花中分离纯化得到的一种异戊烯黄酮类天然有机化合物。许多文献报道,黄腐酚对多种癌细胞生长有显著的抑制作用,如乳腺癌、前列腺癌、胰腺癌、肝癌等。然而,这些研究多基于细胞水平,黄腐酚的体内抗肿瘤活性研究很少有报道。本文以Th1/Th2平衡为核心,旨在探讨黄腐酚对BALB/c-4T1模型小鼠抗肿瘤免疫的影响。首先,构建BABL/c-4T1荷瘤小鼠模型,探究黄腐酚体内抗肿瘤活性,记录分析肿瘤重量和体积的变化,结果显示黄腐酚显著抑制肿瘤的生长;H&E染色检测小鼠肝、肾和肿瘤组织变化情况,结果显示黄腐酚对肝肾无显著影响,同时能够促进肿瘤组织坏死;ELISA和免疫组化实验检测乳腺癌特异性标志物CA153及肿瘤促增殖蛋白Ki-67的表达,结果显示黄腐酚抑制CA153和Ki-67表达。进一步探究黄腐酚对Th1/Th2平衡的影响。流式细胞术检测脾脏淋巴细胞CD8+/CD25+比例及穿孔素、颗粒酶B的表达,结果显示黄腐酚上调CD8+/CD25+比例,促进穿孔素、颗粒酶B的表达,表明机体CTL抗肿瘤应答反应活性提高;ELISA和流式细胞术检测Th1、Th2型细胞因子和Th1/Th2比率的变化。结果表明,黄腐酚促进Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ的表达,抑制Th2型细胞因子IL-4、IL-10的表达,调节Th1/Th2平衡向Th1移动。Western blot和免疫组化检测Th1/Th2发育中关键转录因子的表达,结果显示黄腐酚上调Th1特异性转录因子T-bet表达,下调Th2特异性转录因子GATA-3表达。同时,促进STAT4活化,而对p-STAT6活性无显著影响,表明黄腐酚可能通过调节STAT4活性进而促进Th1/Th2平衡向Th1移动。综上所述,黄腐酚能够显著抑制实验小鼠乳腺癌生长,调节Th1/Th2平衡向Th1移动,促进机体抗肿瘤免疫。推测,这种活性可能与上调p-STAT4有关。此次研究初步探讨了黄腐酚的体内抗肿瘤免疫活性,为进一步确定其作用机理和药物开发提供新的理论依据。