SLC35F2的表达量对非小细胞肺癌细胞活性及药物敏感性的影响

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研究表明人类溶质载体家族35成员F2(SLC35F2)作为SLC溶质家族成员在肺癌、神经母细胞瘤等恶性肿瘤中异常表达,并可直接或间接调控肿瘤的发生发展。检测发现,人非小细胞肺癌(NSCLC)组织中SLC35F2基因高表达,转录水平与肿瘤分期相关,对患者具有显著预后价值;同时SLC35F2在肿瘤细胞中的表达水平和药物转运活性与肿瘤细胞对化疗药物的敏感性有关。本研究在体外肺腺癌细胞系A549,95D中研究SLC35F2表达水平对肿瘤生物学功能和化疗药物敏感性的影响。实验目的:建立稳定的SLC35F2低表达与高表达非小细胞肺癌细胞系A549和95D体外肺腺癌细胞系,通过一系列细胞功能学实验研究SLC35F2表达水平对肿瘤生物学功能和化疗药物敏感性的影响。实验方法:(1)构建SLC35F2低表达与高表达非小细胞肺癌细胞系A549和95D细胞系;(2)通过MTT,细胞周期和凋亡,Transwell小室实验,划痕实验,克隆实验方法研究SLC35F2的表达水平对癌细胞增殖,凋亡,迁移,侵袭能力的影响;(3)用MTT实验确定紫杉醇与YM155最适浓度;(4)通过体外功能实验方法研究SLC35F2对紫杉醇及YM155的药物敏感性的影响。实验结果:下调SLC35F2的表达,MTT实验A549细胞对照组OD490值是0.817,实验组OD490值0.514,细胞增殖能力下降(P=1.55*10-9;p<0.001);克隆实验中克隆数目对照组168,实验组81,克隆细胞数目减少(P-value=0.00002;p<0.001);细胞的凋亡数目对照组4.06,实验组6.3,凋亡数目增加(P-value=0.00056;P<0.001);G1期的细胞对照组数值52.76,实验组数值65.74,G1期细胞数量增多(P-value=9.7*10-5;p<0.001),处于S期的细胞减少(P-value=0.001;p<0.001);Transwell实验中,细胞迁移对照组数值244,实验组数值9,细胞迁移率降低(P-value=2.68*10-6;p<0.001);。紫杉醇处理后的A549细胞在SLC35F2下调后,G1期的细胞数对照组是78.37,实验组是39.03,G1期细胞增多(P-value=0.00087;p<0.001),处于S期的细胞对照组数值8.7,实验组数值14.53,处于S期的细胞减少(P-value=0.00589;p<0.001),细胞增殖能力降低;YM155处理后的A549细胞在SLC35F2下调后,克隆细胞数量对照组58,实验组134,克隆数目增加(P-value=7*10-5;p<0.001);凋亡数目减少(P-value=4.72*10-6;p<0.001);实验结论:SLC35F2的下调与非小细胞肺癌细胞的功能呈正相关;同时会降低紫杉醇和YM155的敏感性。
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