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目的本课题采用RNA干扰技术靶向沉默CPNE1基因,通过体内、体外实验观察CPNE1基因沉默后对肺腺癌细胞株A549、H1299细胞生物学行为的影响,并探讨其相关机制,为临床治疗研究提供实验基础。方法采用免疫组化方法检测CPNE1蛋白在128例肺腺癌组织及30例肺正常组织标本中的表达,并分析其与相关临床病理特征的联系;Western blotting方法检测CPNE1在肺腺癌细胞株A549、H1299中的表达与永生化支气管上皮细胞株中的表达,应用qRT-PCR与Western blotting方法检测A549、H1299细胞中CPNE1的干扰效率,采用CCK-8实验、克隆形成实验、划痕实验、Transwell实验、流式细胞术检测CPNE1基因敲减后对细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭能力及细胞周期的影响,应用Western blotting方法检测与其细胞生物学改变相关蛋白的变化;应用裸鼠模型评估CPNE1基因敲减后A549细胞成瘤能力的影响。结果1.CPNE1蛋白在肺腺癌组织中的表达明显高于肺正常组织,并与淋巴结转移、临床分期有关(P<0.05);而CPNE1蛋白表达水平与患者的年龄、性别、肿瘤大小等临床病理参数之间无明显相关性,差异比较无统计学意义。2.Western blotting方法检测CPNE1在肺腺癌细胞株A549、H1299中的表达较永化支气管上皮细胞株中高;成功构建了CPNE1 RNAi慢病毒载体,qRT-PCR及Western blotting检测显示其对肺腺癌细胞A549、H1299的CPNE1 mRNA水平及蛋白表达水平的抑制均较明显。3.CCK-8实验显示CPNE1敲减后能抑制A549、H1299细胞增殖,克隆形成实验显示CPNE1敲减后能抑制A549、H1299细胞的克隆形成能力;划痕实验及Transwell实验显示CPNE1敲减后能抑制A549、H1299细胞迁移和侵袭能力:流式细胞术检测显示CPNE1敲减后能减少A549、H1299细胞周期中S期细胞比例;Western blotting方法检测结果显示影响细胞生物学改变的相关蛋白水平下调。4.裸鼠成瘤实验显示CPNE1敲减后A549细胞的成瘤能力降低。结论1.CPNE1在肺腺癌组织中的表达较正常肺正常组织高,并与其淋巴结转移、临床分期有关。2.慢病毒包装的CPNE1载体可有效的下调A549、H1299细胞CPNE1的表达。3.CPNE1基因敲减后能够抑制A549、H1299细胞的增殖能力、克隆形成能力、迁移、侵袭、细胞周期进程,其机制与其导致相关基因失调有关。4.CPNE1干扰后能抑制裸鼠体内肺腺癌的生长。