黑熊-家猫种间体细胞核移植研究

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该研究运用体细胞核移植的原理和技术,以六月龄雌性黑熊的成纤维细胞为供核体,去核未受精家猫成熟卵母细胞为受体,构建种间核移植重组胚胎,研究种间体细胞核移植胚胎的构建方法和重组胚胎的体内外发育潜能及其影响因素.并重点讨论影响种间核移植重组胚胎发育的主要因素.主要内容和结果如下:(一)黑熊成纤维细胞的分离培养和纯化.(二)黑熊成纤维细胞的同步化处理和流式细胞仪分析.(三)超数排卵获取家猫成熟卵母细胞的研究.(四)黑熊-家猫种间体细胞核移植研究主要结果.结论:该研究在国内外首次进行黑熊-家猫种间体细胞核移植研究,初步建立了种间体细胞核移植重组胚的构建方法,并获得发育至桑椹胚的黑熊-家猫胚胎,但没有得到囊胚,2-细胞至桑椹胚的重组胚移植给受体动物(雌猫),均未妊娠.说明家猫的去核成熟卵母细胞质能支持黑熊成纤维细胞进行发育程序重编,尚不能维持重组胚胎的囊胚发育和妊娠,其机理还有待进一步的研究.另外,供体细胞的同步化处理、卵母细胞的质量、重组胚胎的构建、激活方法、培养系统等因素都影响异种核移植胚胎的发育.
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