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背景自噬是细胞固有的一种防御机制,正常情况下维持细胞的新陈代谢,当细胞遇到营养匮乏、能量不足等情况时,自噬在维持细胞内环境的稳定方面发挥重要作用。抑郁症是一种复杂而多因素的疾病,研究发现,其发病机制与大脑p11蛋白表达情况密切相关,另有报道称大鼠抑郁症模型观察到大鼠脑部自噬增强的现象,这些证据提示p11可能在一定程度上影响细胞的自噬过程。但是对于p11如何影响自噬的发生,目前尚不清楚。目的通过体外细胞实验探讨p]1的表达对自噬的影响方法1.质粒转化与提取:质粒 p11-pcDNA3.0、pcDNA3.0、p11-si、si-control 由本实验保存,已经经过测序验证。运用感受态大肠杆菌DH5α转化质粒,质粒小提试剂盒提取质粒。2.质粒的验证:运用琼脂糖电泳的方法,检测质粒的质量。3.细胞培养:SH-SY5Y细胞（神经母细胞瘤细胞）培养于含有10%胎牛血清的1640培养基中,放置5%CO2培养箱中培养。平均每天换一次培养液,换液前用PBS洗涤细胞,每周传代2-3次。4.细胞转染:用转染试剂将质粒p11-pcDNA3.0、pcDNA3.0、p11-si、si-control转染入处于对数期生长的SH-SY5Y细胞,转染后6h更换完全1640新鲜培养基。转染24h后荧光显微镜观察细胞绿色荧光情况,48h提取蛋白。5.Western blot检测细胞内蛋白质表达水平:p11蛋白以及细胞自噬相关蛋白LC3、Atg5、p62 等的表达。6.实验结果分析:应用Quantity one灰度分析软件和统计学软件SPSS19.0进行数据分析。结果1.成功提取质粒 p11-pcDNA3.0、pcDNA3.0、p11-si 和 si-control,1.2%琼脂糖电泳结果显示条带与质粒的大小相匹配。2.荧光显微镜观察绿色荧光,显示质粒转染成功（质粒p1 1-si和si-control带有绿色荧光基因）。3.Western Blot 结果显示:.p11-pcDNA3.0 转染入 SH-SY5Y 细胞时,p1 1高表达,p11-si转染入SH-SY5Y细胞时,p11表达受到抑制4.P11对自噬相关蛋白表达的影响:p11高表达时,LC3、p62和Atg5表达受到影响,但不具有统计学意义;p11低表达时,LC3水平升高,p62水平显著降低,Atg5表达也增加,自噬上调。结论神经母细胞瘤细胞内p11蛋白高表达能够改变LC3和p62蛋白水平。神经母细胞瘤细胞内p11的缺失能够上调自噬水平。