解淀粉芽孢杆菌HRH317生物防霉保鲜液的研究

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本研究的目的是利用本试验室的解淀粉芽孢杆菌HRH317菌株研发出一种沙糖桔的生物防霉保鲜液,更安全更有效的延长沙糖桔的防霉保鲜时间。试验内容包括不同处理方式的解淀粉芽孢杆菌HRH317菌株发酵液的培养皿和沙糖桔抑霉试验,小鼠急性毒理学试验,解淀粉芽孢杆菌HRH317生物防霉保鲜液对防霉保鲜液的单因素试验,解淀粉芽孢杆菌HRH317生物防霉保鲜液的主成分响应面试验。确定本试验室解淀粉芽孢杆菌HRH317的发酵液为主要抑菌物质,与壳聚糖、NaCl、吐温-80配合使用做成生物防霉保鲜液,目前本保鲜液只用于防霉保鲜液,其他果蔬的应用有待继续研究。试验结果如下:1.通过对比不同处理方式的HRH317菌株发酵液进行培养皿和沙糖桔抑霉试验,发酵原液的抑菌效果最好,效价是5242880AU/mL;发酵滤液效果最差,测得效价20AU/mL。又通过不同处理方式的HRH317菌株发酵液对沙糖桔进行打孔并进行接种抑霉试验,得最优处理组为发酵原液经室温15d的存放时间,霉变率仅为(53.75±2)%,霉斑大小为(8.75±0.7) mm; CK空白对照组的霉变率100%,霉斑大小为(51.65±2.758)mm。发酵原液经过稀释64倍仍有良好的抑菌活性,霉变率为(58.2±1.5)%,霉斑直径为(14.2±0.85)mm。可初步确定发酵液处理方式为发酵原液。2.通过一日内三次灌胃小鼠总药量为150mL/kg.bw解淀粉芽孢杆菌HRH317发酵液,经过14d观察,小鼠无毒性反应并且无死亡。受小鼠胃容积对灌胃量的限制,不能测出小鼠的LDs0值,可得出最大剂量150mL/kg.bw。解淀粉芽孢杆菌HRH317发酵液的人可经口每日摄入量为0.05mL/kg.bw,即发酵液的小鼠灌胃最大量大于人可能经口日摄入量的3000倍,可初步判定解淀粉芽孢杆菌HRH317发酵液在0-150mL/kg.bw对人体无害。3.利用解淀粉芽孢杆菌HRH317壳聚糖复合保鲜液对沙糖桔进行单因素处理,可得各单因素最佳组相对CK对照组效果良好。壳聚糖2%,HRH317发酵液2%, NaCl0.3%,吐温-802%为各单因素最佳条件,确定了各因素的取值范围。4.通过用27组Box-Behnken响应面设计方法及主成分分析研究壳聚糖、解淀粉芽孢杆菌腿H317发酵液、吐温—80和NaCl四个因素对防霉保鲜液品质的影响,得出最佳配方为壳聚糖添加量为2.513%, HRH317发酵液1.658%,吐温-801.688%, NaCl0.399%。又通过与单因素最佳组,CK组做验证试验,可得响应面最佳组合为最优组。
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