乳酸菌是动物消化道内的有益微生物,代谢产生抑菌物质,具有抗菌谱广、不易产生耐药性等优点,而且乳酸菌兼具营养保健的功能,是备受关注的新型饲料添加剂。本研究以抑菌活性乳酸菌为研究对象,根据菌株的生长代谢特点进行共培养组合的筛选,获得了适合共培养的高效抑菌活性的乳酸菌共培养组合。并优化乳酸菌组合共培养代谢产抑菌物质的条件,并分析了其对常规抗生素的敏感性及其与常规益生菌的拮抗性,以期开发乳酸菌作为新型饲料添加剂及其生产应用提供一定的参考。具体研究内容与结果如下:1、抑菌活性乳酸菌共培养组合的筛选选取嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、发酵乳杆菌测定各培养上清液的抑菌活性,发现该4株乳酸菌对大肠埃希氏菌、阴沟肠杆菌、金黄色葡萄球菌、禽致病性大肠杆、铜绿假单胞菌、粪肠球菌、甲型副伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌、禽多杀性巴氏杆菌10种病原指示菌表现出了不同的抑制作用,具有广谱抑菌性。在嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、发酵乳杆菌单独培养与两两组合共培养的生长特性基础上,以乳酸菌的生物量及抑菌活性为指标,对嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、发酵乳杆菌两两组合共培养及单独培养的情况进行比较分析,筛选出能够促进高产抑菌物质的共培养乳酸菌组合。结果表明,在相同前提条件下,干酪乳杆菌与嗜酸乳杆菌共培养后生物量和抑菌活性均有所提高,其OD600nm值(5.667±0.045),抑菌圈直径达(19.53±1.15)mm,故选取该组合为共培养复合菌。2、干酪乳杆菌与嗜酸乳杆菌共培养条件优化以干酪乳杆菌与嗜酸乳杆菌组合共培养上清液的抑菌活性为指标,筛选廉价的碳源、氮源培养基原材料,获取优化发酵培养基。培养基组方:1.32%葡萄糖、0.68%蔗糖、1.5%酵母浸粉、0.5%麸皮,0.005%硫酸锰,0.02%硫酸镁,0.05%无水乙酸钠、0.2%磷酸氢二钾。在优化培养基的基础上,分析了培养时间、温度、接种量、装液量对干酪乳杆菌与嗜酸乳杆菌共培养产抗菌物质的影响。结果显示,干酪乳杆菌与嗜酸乳杆菌于优化培养基中,在接种量4%、装液量40%于33℃静置共培养30h后,共培养上清液的抑菌活性最强,其抑菌圈直径可达24.87mm。3、抑菌活性乳酸菌的抗性分析乳酸菌与几株常规使用的益生菌间的拮抗实验表明:嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、发酵乳杆菌与酿酒酵母菌及重组Av BD9毕赤酵母菌之间均未出现明显拮抗现象,而对枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌均产生了不同程度的拮抗效应。在复配使用时应注意选择合适的复配方式,以达到较为理想的应用效果。该4株乳酸菌对8种常规抗生素表现出了不同程度的敏感性,在日常生产应用中应注意调配使用并及时补充乳酸菌活菌剂。以上研究表明,经生物量、抑菌活性变化的比较分析,筛选出一组可以进行共培养的广谱高抑菌活性的干酪乳杆菌与嗜酸乳杆菌共培养组合。优化获得了干酪乳杆菌与嗜酸乳杆菌共培养产抑菌物质的最佳条件,一定程度上降低了培养基的原料成本,简化了生产工艺,为提高乳酸菌产生抑菌物质及其工业化生产应用上奠定了基础。益生菌间的拮抗研究及对常规抗生素的不同敏感性,为含有乳酸菌的复合制剂作为饲料添加剂等在畜禽安全生产的应用提供参考。