经筋微创疗法治疗膝骨性关节炎临床疗效及对TLR4信号转导通路影响

来源 :广州中医药大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:shiqiuqiu100
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目的:1.以药物、药物加电针为对照,观察经筋微创松解疗法治疗人膝骨性关节炎的临床疗效。2.通过对木瓜蛋白酶诱导的兔膝骨性关节炎TLR4/MyD88/NF-κB信号转导通路的实验研究,阐明经筋微创松解技术治疗膝骨性关节炎的作用机制。方法:1.临床研究:在广州军区广州总医院中医科门诊、住院病房的患者,由广州军区广州总医院确诊膝骨性关节炎的,根据诊断、纳入、排除标准,选择患者60例。将研究对象随机分成三组,分别为药物组、药物加电针组、药物加经筋微创松解组。观察三组研究对象治疗前及治疗1个月后临床及实验室指标,并根据VAS评分、WOMAC评分量表评价临床疗效。最后将三组所得的各项指标进行组间对照,统计学处理进行数据分析,得出结论。2.实验研究:选取24只清洁级健康6月龄新西兰兔,体重2kg±0.5kg,雌雄各半,取6只为空白组,其余18只统一采用1.6%木瓜蛋白酶于实验第1、4、7天左膝关节腔注射造模,空白组予以等剂量0.9%生理盐水膝关节腔内注射;在造模6周后,将18只新西兰兔随机分为三组,分别为经筋微创组、电针组、造模组,每组各6只。单笼饲养,笼大小可保证其自由活动。实验室温度恒定,23℃-25℃,湿度60%,紫外线定期消毒,自由饮食摄水。在造模过程中,如出现足底溃烂、足底咬伤、骨折、皮肤感染、腹泻等情况,均予以剔除。造模结束1周后,四组兔各随机抽取1只予X线正侧位摄片,与空白组相比,其余各组均可见明显关节间隙狭窄、骨赘形成、软骨下骨硬化、软骨下囊变,提示造模成功。按照组别开始进行电针、经筋微创治疗干预,共治疗4周。其中,电针治疗隔天1次,每周3次;经筋松解组行针刀镜治疗1次后1周行经筋刀治疗,经筋刀1次/周,持续3周。各组兔于治疗结束后1周用空气栓塞法处死。大体观察各组左膝关节软骨和滑膜等的病理表现,光镜观察各组兔左膝关节软骨切片病理表现,荧光定量PCR和Western Blot分别检测TLR4、MyD88、NF-κB基因和蛋白表达。最后用统计学处理进行数据分析。结果:1.临床研究:根据VAS评分、WOMAC量表评分做统计学分析,药物组、药物加电针组、药物加经筋微创组在治疗4周后与治疗前相比差异有统计学意义(P<0.05);组间比较,药物加经筋微创组优于药物组及药物加电针组(P<0.05),差异有统计学意义。2.动物实验:造模成功后予干预治疗4周,干预治疗结束后,①大体观察各组兔关节软骨和滑膜表现:空白组滑膜呈淡红色,无充血、水肿,关节面光滑、无赘生物,软骨色泽较透亮,关节液清亮、无浑浊,关节囊无增厚;造模组左膝关节明显肿胀,打开后滑膜增厚、有充血,关节软骨颜色暗淡、无光泽,骨面凹凸不平较毛糙,可见数个骨赘形成,关节液颜色淡黄浑浊、质粘稠,关节囊明显增厚;电针组左膝关节轻度肿胀,打开后滑膜轻度增厚伴少许充血,软骨色泽淡白,骨面轻度缺损,少许骨赘,关节液较清亮,关节囊轻度增厚;经筋微创组左膝关节轻度肿胀,滑膜增生较空白组重、较电针组轻,无明显充血,软骨色泽淡白、骨面轻度缺损,可见少许骨赘,关节液量较空白组多,质清,关节囊轻度增厚。②光镜观察各组兔软骨HE染色病理切片结果:经筋微创组膝关节软骨表面轻度破坏,四层结构基本正常,软骨细胞排列大致正常,可见少许新生软骨细胞,潮线较清晰,无细胞簇集及血管翳;电针组膝关节软骨表面欠光滑,表层轻度破坏,四层结构不清晰,软骨细胞排列较乱,部分软骨有簇集,潮线模糊,未见血管翳;造模组膝关节软骨表面粗糙,软骨层厚薄不均,四层结构分辨不清,部分软骨层有裂隙、剥脱,软骨细胞排列杂乱,部分软骨细胞簇集,潮线扭曲,部分可见血管翳;空白组膝关节软骨表面光滑,厚度正常,四层结构分辨清晰,软骨细胞排列有序,切层软骨细胞呈梭形分布于软骨表浅层,未见软骨细胞簇集现象,潮线清晰,未见血管翳。③荧光定量PCR和Western Blot分别检测各组软骨TLR4、MyD88、NF-κB基因和蛋白表达变化:经筋微创组、电针组、造模组TLR4、MyD88、NF-κB基因和蛋白表达较空白组明显上调,经筋微创组较电针组及造模组相比TLR4、MyD88、NF-κB基因和蛋白表达有所下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.临床研究:通过观察、对比药物联合经筋微创疗法、药物联合电针及单纯运用药物治疗膝骨性关节炎的疗效可知,三种治疗方法均能缓解关节疼痛、肿胀等,改善关节功能活动障碍。而经筋微创疗法相较电针及单纯药物治疗,缓解病情速度更迅速、整体疗效显著,值得临床推广。2.实验研究:通过大体观察关节软骨和滑膜等表现、光镜下观察软骨HE染色病理切片、荧光定量PCR和Western Blot分别检测各组软骨TLR4、MyD88、NF-κB基因和蛋白表达的变化,推测经筋微创松解疗法可能通过调控TLR4信号转导通路,抑制下游MyD88、NF-κB,阻断炎性细胞因子的分泌,减少软骨破坏,改善关节活动功能障碍、晨僵等症状,从而达到控制疾病进一步发展的目的。
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