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目的:间质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)作为肿瘤微环境中的重要组成成分调节着肿瘤的生物学行为。在过去的研究中我们成功从胃癌组织中分离得到胃癌间质干细胞(gastric cancer-derived MSC,GC-MSC)并发现GC-MSC促进胃癌的发展。但GC-MSC中YAP分子作用仍不清楚。本研究旨在阐明GC-MSC中YAP分子在胃癌发展过程中的作用。方法:Western blot检测比较骨髓间质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BM-MSC)与GC-MSC中YAP分子的表达差异。通过慢病毒YAP-ShRNA对GC-MSC中YAP分子进行敲减,应用qRT-PCR和Western blot检测YAP的敲减效率。平板克隆实验、Western blot、免疫荧光实验、Transwell迁移实验和侵袭实验检测敲减后的GC-MSC细胞增殖、迁移、侵袭、上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)以及干性能力的改变。平板克隆实验,免疫荧光实验、流式细胞术、qRT-PCR和Western blot分别检测Blank组SGC-7901细胞(Blank SGC-7901),Control组GC-MSC培养上清(conditioned medium,CM)处理的SGC-7901细胞[GC-MSC(Control)-CM SGC-7901]以及ShYAP组GC-MSC培养上清处理的SGC-7901细胞[GC-MSC(ShYAP)-CM SGC-7901]的增殖、凋亡、迁移、侵袭能力及EMT指标的变化。qRT-PCR检测3种不同培养上清处理的SGC-7901细胞中促血管形成相关基因IL-6、PDGF和VEGF的变化。采用血管形成试验和迁移实验检测敲减YAP的GC-MSC培养上清处理SGC-7901细胞72h后SGC-7901上清促血管形成能力的改变。qRT-PCR和Western blot检测三种不同处理的SGC-7901中β-catenin及其下游靶基因CD44和CyclinD的表达变化。分别将3种不同培养上清处理的SGC-7901细胞接种裸鼠,构建裸鼠5致瘤模型,测定3组模型致瘤瘤体大小和重量。免疫组化和免疫荧光检测瘤组织中Ki67、β-catenin、E-cadherin、Vimentin及CD31的表达。结果:与BM-MSC相比,YAP在GC-MSC中高表达。YAP敲减可抑制GC-MSC中增殖相关蛋白PCNA及Ki67的表达,EMT相关蛋白N-cadherin、Vimentin的下调和E-cadherin的上调,干性蛋白CD44、Sall4和Nanog的下调。同时,GC-MSC增殖、迁移和侵袭能力也明显下降。GC-MSC(ShYAP)-CM SGC-7901中PCNA及Ki67的表达降低,EMT相关蛋白N-cadherin、Vimentin的下调和E-cadherin的上调,血管形成相关基因IL-8、PDGF和VEGF表达下调,凋亡相关蛋白Bcl2和Bax没有明显改变。其增殖、迁移、侵袭能力及促血管形成能力也明显下降。研究显示YAP敲减的GC-MSC培养上清可以抑制SGC-7901中对胃癌发展有重要作用的β-catenin及其下游靶基因CD44和CyclinD的表达。裸鼠皮下致瘤实验表明,YAP敲减的GC-MSC培养上清处理的胃癌细胞体内致瘤能力明显下降。免疫组化、免疫荧光结果显示GC-MSC(ShYAP)-CM SGC-7901形成的瘤组织中E-cadherin表达升高,Ki67、β-catenin、Vimentin及CD31表达明显下降。结论:YAP敲减不仅可以抑制GC-MSC增殖、迁移、侵袭、EMT及干性分子的表达,还能抑制体外胃癌细胞的增殖,迁移,侵袭及促血管形成能力,抑制体内胃癌的发展。YAP敲减的GC-MSC培养上清可能通过调控胃癌细胞中β-catenin的表达来影响胃癌的发展。