云南三种蜂花粉多酚的制备及抑制黑色素瘤B16细胞生物活性研究

来源 :昆明理工大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:cyscwbr
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本论文研究了油菜、玉米和玫瑰三种蜂花粉中游离态和结合态多酚类物质含量和组成;采用铁离子还原能力、ABTS和DPPH自由基清除能力三种模型评价其抗氧化能力;同时测定了其对蘑菇酪氨酸酶活性的抑制作用;进一步研究了对B16细胞的增殖形态、黑色素含量和酪氨酸酶活性的影响以及细胞内抗氧化水平的测定;并通过测定与黑色素合成有关因子的mRNA的表达初步探讨其影响黑色素合成的分子机制。结果表明,三种蜂花粉游离态总多酚含量为11.37-23.36mg GAE/g DW,结合态为0.69-1.47mg GAE/gDW;游离态总黄酮含量为17.25-19.24mg RE/g DW,结合态为2.42~3.65mg RE/g DW。多酚类物质大多以游离态形式存在,三种花粉游离态多酚提取物均富含芦丁,而结合态中鞣花酸含量较高;三种蜂花粉游离态和结合态多酚提取物在三种抗氧化模型中均显示了一定的活性,其中油菜蜂花粉游离态多酚提取物的抗氧化活性最好;三种蜂花粉游离态和结合态多酚提取物抑制蘑菇酪氨酸酶活性都显著高于阳性对照Vc,其中玉米结合态和油菜游离态多酚提取物抑制蘑菇酪氨酸酶活性最好;三种蜂花粉多酚提取物一定程度上影响了B16细胞的增殖和形态,并且显著降低了B16细胞内相对黑色素含量和酪氨酸酶活性,其中油菜蜂花粉游离态提取物的生物活性最好;通过细胞内GSH/GSSG的测定,三种蜂花粉多酚提取物都在一定程度上提高了细胞内的抗氧化水平。同时通过测定细胞内Tyrosinase、TRP-1、TRP-2、MITF、 MC1RmRNA表达量来初步探讨其影响黑色素生成的分子机制,研究结果表明,油菜蜂花粉游离态多酚提取物主要是通过下调酪氨酸酶家族的Tyrosinase和TRP-1的表达来抑制黑色素生成,此外MITF和MC1R的表达量也略有下降,进而影响了黑色素的合成,其影响黑色素生物合成的具体途径还需进一步研究。
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