在世界范围内,肝癌是最常见的恶性肿瘤之一。乙型肝炎病毒感染是诱发肝癌的主要病因,乙肝病毒能够长期刺激肝脏细胞,引发肝硬化,促使肝癌的发生。早期肝癌不具备明显的临床症状,许多患者在发现时已是中晚期。因此肝癌的早期诊断对于降低肝癌死亡率具有重大意义。研究发现,肝癌发生发展过程伴随着蛋白质唾液酸修饰异常。唾液酸是一类酸性九碳单糖,人体内主要以N-乙酰神经氨酸的形式存在,主要位于蛋白质糖链修饰的还原端。作为一种重要的蛋白翻译后修饰,唾液酸修饰通常是C2羟基以α2,3或α2,6糖苷键连接在半乳糖上。蛋白质异常唾液酸修饰包括唾液酸修饰整体水平异常和唾液酸连接方式异常。研究表明,分析肝癌患者血清蛋白唾液酸连接方式异常有助于肝癌早期诊断的发展。然而,受技术手段限制,唾液酸异常连接方式无法被直接准确检测。本研究通过唾液酸特异性衍生化修饰,将具有不同连接方式的唾液酸残基分别发生异丙胺酰胺化和甲胺酰胺化,从而改变唾液酸残基的分子质量。利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）检测不同分子质量的唾液酸。首先本研究利用酰肼珠固定血清N聚糖,接连进行两次唾液酸衍生化步骤,使α2,3唾液酸连接甲基,α2,6唾液酸连接异丙基,从而产生质量差。自酰肼珠洗脱N糖,完成全甲基化步骤和脱盐步骤。利用MALDI-TOF质谱进行分析,可以检测到不同分子量唾液酸的质量差。接下来,本研究利用四种不同来源的血清样本,分别是乙肝相关肝癌患者、非乙肝相关肝癌患者、肝硬化患者和健康人对照。通过特异性衍生化方法测定不同连接的唾液酸,进而获取MALDI-TOF质谱原始数据。通过Clin Pro Tools 3.0软件前处理质谱原始数据。通过绘制光谱视图、凝胶视图分析组内数据均一性和组间数据差异性。结果显示,糖链H5N3E1峰相对强度在肝癌组与非肝癌组中存在显著性差异（p<0.001）;糖链H4N4F2E1峰相对强度在乙肝相关肝癌组和非乙肝相关肝癌组中存在显著性差异（p<0.001）;H6N5F1E1峰相对强度在肝硬化组和健康人组中存在显著性差异（p<0.0001）。本研究发展了一种分析唾液酸连接异常并寻找不同组间存在显著性差异的唾液酸峰的方法,利用该方法完成了对于肝脏相关疾病的检测,找到一组唾液酸修饰N糖链在不同组间表达水平存在显著性差异,为日后找到新的肝癌肿瘤标志物、乙肝相关肝癌肿瘤标志物和肝硬化疾病标志物做出积极的提示,为早期诊断肝癌的研究提供新方向。