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锥属(Castanopsis)属壳斗科植物为亚热带常绿阔叶林和热带山地雨林的主要组成树种,分布在亚洲南部及东南部,全世界大约有120种。在广西壮族、瑶族等少数民族地区常常作为中草药使用,叶、皮均可药用,具有清热解毒、涩脉止血等功效,主要用于治疗肿瘤、慢性溃疡、止血消肿、排毒等,其疗效显著,在民间代代相传,使用历史悠久。目前本课题组已系统进行了苦槠、南岭栲、钩锥、米槠、甜槠等植物的化学成分研究,发现锥属植物中含有大量多酚类、黄酮类、鞣花单宁类成分。三萜鞣花单宁类化合物是目前为止发现不多的只存在于锥属植物中的天然化合物,该类化合物空间结构独特,由具有独特空间结构的五环三萜与独特多元酚结构的鞣花单宁酸通过酯化反应生成。瓦山锥(Castanopsis ceratacantha)属锥属(Castanopsis)植物,乔木。通过前期HPLC和TLC检测,发现瓦山锥叶中含有三萜鞣花单宁成分。因此本研究选用瓦山锥树叶为实验材料,系统开展其化学成分的分离、结构鉴定和抗氧化性研究。通过对瓦山锥中化学成分的研究,为其在经典分类中系统位置有争议的壳斗科植物中锥属的系统位置提供证据。研究主要内容和结论如下:1、瓦山锥化学成分分离与结构鉴定。干燥瓦山锥树叶3.5 kg,切成碎片后用80%乙醇室温浸提2次,每次32 L,每次7 d,过滤后合并滤液,滤液经过减压浓缩,得到浸膏481.3 g。浸膏加水充分溶解后经Sephadex LH-20、Diaion HP20SS、MCI gel CHP 20P、Chromatorex C18、Toyopearl HW-40F等层析及半制备高效液相色谱进行分离,然后采用1H-NMR,13C-NMR,HR-MS等多种波谱技术鉴定化合物结构。共分离得到28个化合物。主要涉及酚酸类化合物13个:原儿茶酸(CC-1)、没食子酸(CC-2)、咖啡酸(CC-3)、1-(3’,4’-二羟基肉桂酰)-环戊-2,3-二酚(CC-4)、绿原酸(CC-5)、绿原酸甲酯(CC-6)、6-O-没食子酰基熊果苷(CC-7)、3-methoxy-4-hydroxyphenol 1-O-β-D-(6’-O-galloyl)glucopyranoside(CC-8)、aviculin(CC-9)、pedunculagin(CC-10)、praecoxin A(CC-11)、1,2,3,4,6-penta-O-gally-β-D-glucopyranose(CC-12)、casuarictin(CC-13)。黄酮类化合物8个:山奈酚(CC-14)、异槲皮素(CC-15)、山奈酚3-O-β-D-葡萄糖醛酸吡喃糖苷(CC-16)、槲皮素3-O-β-D-葡萄糖醛酸吡喃糖苷(CC-17)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷-6’’-甲基酯(CC-18)、芦丁(CC-19)、槲皮素5-O-[α-L-鼠李糖苷-(1→6)]-β-D-葡萄糖醛酸吡喃糖苷(CC-20)、山奈酚-3-O-{β-D-木吡喃基-(1→2)-[α-L-鼠李糖苷-(1→6)]-β-D-葡萄糖醛酸吡喃糖苷(CC-21)。鞣花单宁类化合物7个:dilactona doácido valoneico(CC-22)、castalin(CC-23)、vescalin(CC-24)、castalagin(CC-25)、vescalagin(CC-26)、chinquapinic acid(CC-27)、castacrenin D(CC-28)。所有化合物均首次从瓦山锥植物中分到。2、瓦山锥树叶总黄酮含量测定。采用超声提取法,回流提取法和浸渍法探究瓦山锥总黄酮的最佳提取工艺,以芦丁作为对照,紫外分光光度法测定瓦山锥总黄酮含量,线性方程为Y=0.0845X+0.0003(R2=0.999 9)。对瓦山锥不同提取方法总黄酮含量结果可知,浸渍法的总黄酮含量最高,为54.01%,超声提取法为50.50%,回流提取法为49.87%。由于三种方法结果相差不大,且浸渍法所用溶剂较多,回流提取法时间也较长,而超声提取法工艺简便,耗材较少,时间较短,因此本实验进一步探究了超声提取法的最优条件。采用单因素实验方法,最终得到最优条件为提取时间15 min,乙醇浓度50%,料液比1:40(g/m L)。3、瓦山锥树叶抗氧化性研究。主要研究了不同提取方法的瓦山锥浸提物和瓦山锥不同极性部位对DPPH自由基、羟自由基清除能力和还原力。以Vc作为对照,对不同提取方法的瓦山锥浸提物进行研究,结果表明瓦山锥总黄酮对DPPH自由基清除能力和还原力较强,有一定的羟自由基清除能力,但都低于Vc;对瓦山锥不同极性部位的研究结果显示,各部位有较好的清除DPPH自由基、清除羟自由能力和还原力,且Fr.3-6的DPPH自由基清除作用强于Vc,Fr.4-6的还原力强于Vc。