论文部分内容阅读
目的:观察钛离子作用于Jurkat T淋巴细胞后KCa3.1通道表达情况及阻断KCa3.1通道前后细胞膜电位、胞内钙离子变化，探讨KCa3.1通道在钛离子对JurkatT淋巴细胞活化中可能存在的作用机制。 方法:1、体外培养Jurkat T淋巴细胞，采用植物凝血素(PHA)预活化，CCK8法检测不同浓度钛离子对活化Jurkat T淋巴细胞的增殖影响。 2、根据是否被植物凝血素(PHA)预活化，将Jurkat T淋巴细胞分为PHA(+)及PHA（-）两大组，两组分别加入浓度为0μmol/L、25μmol/L、50μmol/L和100μmol/L钛离子，作用12h后，实时荧光定量多聚酶链反应技术(Real-time PCR)检测KCa3.1通道的表达量。流式细胞术检测TRAM-34阻断前后Jurkat T淋巴细胞膜电位及细胞内钙离子浓度的变化。 结果:1、钛离子对预活化Jurkat T淋巴细胞随着钛离子的浓度的增加增殖更加明显(P＜0.05)。 2、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L浓度的钛离子在PHA（-）Jurkat T淋巴细胞作用的下培养12小时，随着钛离子浓度的增加KCa3.1mRANA相对于对照组表达增加，差异没有统计学意义(P＞0.05)。25μmol/L，50μmol/L，100μmol/L浓度的钛离子在PHA(+)Jurkat T淋巴细胞作用的下培养12小时，随着钛离子浓度的增加KCa3.1mRANA表达增加，差异有统计学意义(P＜0.05)。 3.KCa3.1通道被TRAM-34阻断后，50μmol/L钛离子（PHA-）Jurkat T淋巴细胞组的膜电位与不加钛离子组比较差异无统计学意义(P＞0.05)，TRAM-34(+)与TRAM-34（-）组间比较差异有统计学意义(P＜0.05);50μmol/L钛离子(PHA+)Jurkat T淋巴细胞组的膜电位与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)，TRAM-34(+)与TRAM-34（-）组间比较差异有统计学意义(P＜0.05)。50μmol/L钛离子（PHA-）Jurka T淋巴细胞组的钙离子浓度与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)，TRAM-34(+)与TRAM-34（-）组间比较差异无统计学意义(P＞0.05);50μmol/L钛离子组(PHA+)JurkatT淋巴细胞组的钙离子浓度与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)，TRAM-34(+)与TRAM-34（-）组间比较差异有统计学意义(P＜0.05)。 结论:1.100μmol/L以内的钛离子能增加活化Jurkat T淋巴细胞的增殖效应。 2.钛离子可引起活化Jurkat T淋巴细胞KCa3.1通道表达的改变。 3.KCa3.1通道可在一定程度上调节钛离子对活化Jurkat T细胞内钙离子浓度及膜电位。