目的利用海藻酸纳-成年软骨细胞复合构建工程化软骨,并观察应用该工程软骨移植修复成年兔关节软骨缺损的长期效果。方法取34w龄成年新西兰兔双膝关节软骨,分离软骨细胞,与海藻酸钠混合,细胞密度为4×10~6/ml,通过硅胶模型制成圆形柱状海藻酸纳-软骨细胞盘(20ul/个),体外培养。分别于2、4、6、8、10w取细胞盘,行HE、AB-PAS染色、免疫组化分析。同时选用成年新西兰兔28只,两侧股骨内髁造成全层软骨缺损模型,缺损处随机植入体外培养4周的海藻酸钠-软骨细胞盘(实验组)及无细胞的海藻酸钠载体(对照组),分别于术后6、12、24、48w取材,观察软骨缺损修复情况。结果成年软骨细胞在海藻酸钠中呈丛状或球状增殖,4w时达增殖高峰,培养期内软骨细胞始终呈圆形或椭圆形,免疫组化显示盘中Ⅱ型胶原含量丰富,无Ⅰ型胶原产生。动物实验示实验组软骨缺损以透明样软骨修复为主,对照组则以纤维组织填充为主,48w时两组修复组织均有一定程度退变。结论成年软骨细胞在海藻酸钠中体外培养可维持良好的细胞表型,并形成工程化软骨。用此工程化软骨修复关节软骨损伤经48w观察有透明样软骨修复。