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Axin是一种抑癌基因，在胚胎发育过程中控制体轴的形成。Axin是一种多功能的构架蛋白，在许多重要的信号传导途径中扮演着重要的角色：在Wnt信号通路中，Axin作为负调控因子与APC(adenomatous polyposis coli)，GSK-3β(glycogen synthase kinase-3β)，β-catenin形成蛋白复合体下调β-catenin的水平；在JNK信号通路中，Axin与MEKK1或MEKK4相互结合，激活JNK，诱导细胞凋亡；在TGF-β信号通路中，Axin通过与Smad3调节TGF-β的转录活性；在p53信号通路中，Axin与p53，HIPK2(homeodomain-interacting protein kinase-2)形成三聚体复合物，调节p53的转录活性。这些信号途径对细胞的各种生理过程如细胞的生长，增殖，分化，癌变，凋亡及细胞周期起着重要的调控作用。目前我们对Axin与JNK的三级激酶MEKK1或MEKK4形成复合物继而激活JNK的分子机制有了清楚的认识，但对Axin与JNK的二级激酶MKK4和MKK7的关系还不清楚。因此，本论文采用生物化学，分子生物学和细胞生物学的方法对Axin与JNK的二级激酶MKK4和MKK7的关系进行研究和阐述，进一步揭示Axin激活JNK的完整分子机制。本论文发现：(1)Axin不能与MKK4和MKK7直接相互结合。(2)在293T细胞中采用RNA干扰的方法特异性地分别抑制MKK4和MKK7表达后，Axin激活JNK的程度有明显的差异。当MKK4和MKK7的表达同时被抑制，Axin基本不激活JNK。而在MKK7的表达被抑制时，Axin对JNK的激活程度明显小于当MKK4的表达被抑制时。也就是说，Axin需要MKK4和MKK7对JNK最大程度的激活，但MKK7在这一过程中起关键作用。(3)利用鼠胚胎成纤维野生型细胞、缺失MKK4基因的鼠胚胎成纤维细胞和缺失MKK4和MKK7基因的鼠胚胎成纤维细胞证明了Axin在激活JNK的过程中对MKK7具有强烈的依赖性。(4)在上述野生型和基因敲除型细胞中，我们对比了Axin与Dishevelled，LMP-1及山梨醇(Sorbitol)激活JNK的程度，进一步证实了MKK7在Axin激活JNK过程中的重要性。(5)采用荧光染色技术，对Axin诱导上述细胞凋亡率的统计，证明Axin主要通过MKK7来激活JNK而诱导细胞凋亡。本论文还对Axin2激活JNK的分子机制进行了初步的研究和阐述。Axin2与Axin(Axin1)具有较强的同源性，在生物学功能上也类似。本论文发现：Axin2能较强程度地激活JNK；Axin2也能与MEKK1及MEKK4直接相互结合；MEKK1和MEKK4的显性负作用突变体能有效地抑制Axin2对JNK的激活；通过对MEKK1在Axin2上激活区域的初步定位，发现MEKK1在Axin2上的结合区域在C末端，不同于Axin1(在N末端)。综上所述，本论文发现Axin在激活JNK的过程中，二级激酶MKK7起了关键作用，完善了Axin活化JNK的分子机制，揭示了Axin激活JNK的复杂性。另外，本论文还就Axin2激活JNK的分子机理进行了初步探索，丰富了Axin／JNK信号通路的相关知识，对充分认识Axin作为多功能构架蛋白在多种信号传导途径中的整合作用及其生物学效应具有重要意义。